结节性皮肤病病毒A27L蛋白的可溶性表达及其多克隆抗体制备

旨在获得结节性皮肤病病毒(LSDV)的broad-spectrum antibiotics重组A27L蛋白并制备其多克隆抗体,将密码子优化的A27L基因进行人工合成,随后克隆至pET-28a表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a-A27L,将selleck化学其转化入BL21(DE3)感受态细胞中,用0.5 mmol/L IPTG进行诱导表达,利用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析。经优化表达条件获得分子质量约为19 kDa的可溶性重组A27L蛋白。采用High Affinity Ni-Charged Resin FF对可溶性表达产物进行纯化,成功获得高纯度的重组A27L蛋白,将其免疫新西兰大白兔4次后收集血清,Western-blot分析和间接免疫荧光鉴定结果表明A27L多克隆抗体可特异识别BHK-21细胞中表达的重组A27L蛋白。本研究利用大肠杆菌成功表达了可溶性重组LSDV A27L蛋白,并制备出特异的A27L多克隆抗体,为深入研究A27L蛋白的生物学功能以及研发结节INCB018424 molecular weight性皮肤病疫苗和诊断技术提供了基础。