帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经退行性疾病,其主要症状包括肢体僵硬、震颤和运动减慢等。目前,全球有数百万人患有帕金森病。寻找治疗和预防帕金森病的方法,可以有助于减轻病人的痛苦并提高他们的生活质量。随着世界人口老龄化的进程加快,帕金森病也逐年高发,越来越多人的寿media literacy intervention命和身体健康受到了挑战。研究帕金森病可以促进我们对神经退行性疾病的理解。帕金森病的发生与大脑中的多巴胺神经元受损有关,因此,深入研究帕金森病有助于我们更好地了解神经元的运作和神经系统的功能。这将有助于更好地理解PD等神经退行性疾病的病理生理机制,从而为治疗和预防这些疾病提供更好的基础。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)是α-阻遏蛋白家族的成员,是葡萄糖和脂质代谢的中央调节器,与氧化应激和炎症反应有关,与神经退行性疾病关系密切。富含亮氨酸的重复激酶2(leucine rich repeat kinase 2,LRRK2)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族(丝氨酸/苏氨酸激酶)。它是一种与帕金森病相关的基因,由PARK8基因所编码。LRRK2已被证明是自噬过程中的关键调节因子之一,可通过直接或间接地作用于自噬相关蛋白(如Beclin-1和LC3)来影响自噬的调节。研究目的:研究TXNIP在帕金森病中的作用,探究其是否是通过PTEN-AKT-mTOR通路来影响LRRK2在帕金森病中调节自噬的发生进程。实验方法:Western Blot(WB)检测在MPTP诱导的PD小鼠模型大脑前额叶皮层(PFC)、内侧前额叶皮层(mPFC)、胼胝体(CC)和中脑黑质区(SNpc)中TXNIP和LRRK2等分子的表达情况。利用MPP~+诱导SH-SY5Y和PC12细胞构建细胞PD模型。采用CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8)检测细胞活力。WB检测MPP~+诱导神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和PC12细胞系PD模型中TXNIP和LRRK2等分子的表达情况。结果:(1)在PD模型小鼠大脑前额叶皮层、内侧前额叶皮层、胼胝体、黑质致密部中TXNIP蛋白表达显著下降,而LRRK2蛋白表达显著增加。(2)在PD模型小鼠大脑前额叶皮层、内侧前额叶皮层、胼胝体、黑质致密部中AKT蛋白均表达显著下降,磷酸化AKT水平均显著下降;小鼠大脑前额叶皮层和黑质致密部中磷酸化PTEN水平均显著增加,而内侧前额叶皮层和胼胝体中磷酸化PTEN水平呈现相反趋势,均显著下降;mTOR蛋白表达水平除胼胝体无显著变化外,大脑前额叶皮层、内侧前额叶皮层和黑质致密部中均显著增加。(3)BLZ945抑制剂在PD模型小鼠大脑前额叶皮层中p62表达水平显著增加,LC3Ⅱ表达水平显著下降;在PD模型小鼠大脑内侧前额叶皮层中p62表达水平显著增加,LC3Ⅱ表达水平显著增加;在PD模型小鼠大脑胼胝体中p62表达显著水平增加,LC3Ⅱ表达水平变化不显著;在PD模型小鼠大脑黑质致密部中p62表达水平显著下降,LC3Ⅱ表达水平显著增加。(4)MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞模型中的TXNIP表达量显著升高;LRRK2表达量极显著下降。与对照组相比,MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞模型中的PTEN蛋白表达量和磷酸化水平均显著降低;AKT蛋白表达量显著下降;mTOR蛋白表达量显著下降。MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞模型中的p62蛋白表达量显著增加;LC3Ⅱ蛋白表达量显著下降;LC3I蛋白表达量显著增加。(5)与对照组相比,MPP~+诱导的PC12细胞模型中的TXNIP表达量显著下降,其中0.5mM MPP~+诱导的PC12细胞模型中的TXNIP下降显著;LRRK2表达量在1mM刺激下显著下降。与对照组相比,MPP~+诱导的PC12细胞模型中的PTEN蛋白表达量显著下降而磷酸化水平均显著增加;AKT蛋白表达量显著下降,磷酸化水平也显著下降;0.5 mM MPP~+刺激PC12细胞中mTOR蛋白表达量显著下降。MPP~+诱导的PC12细胞模型中的p62蛋白表达量显著下降;0.25mM MPP~+诱导的PC12细胞LC3Ⅱ蛋白表达量显著下降,而1 mM MPP~+诱导E7080的PC12细胞LC3Ⅱ蛋白表达量显著增加。总结:TXNIP和LRRK2与PD发病密切相关,推测TXNIP可能与LRRK2存在负调控关系。TXNIP可能通过PTEN-AKT-mTOR通路调节LRRK2参与PD发病及病程。在PD模型小鼠大脑前额叶皮层、内侧前额叶皮层、胼胝体、黑质致密部和SHSY5Y和PC12细胞的PD细胞模型中自噬的激活和被抑制可能与PTEN-AKT-mTOR通路有关。