目的:高尿酸血症(HUA)与痛风是体内嘌呤代谢紊乱引起尿酸(UA)代谢失常的代谢类疾病。余甘子因富含多种生物活性成分而表现出抗氧化应激、抗炎、抗肿瘤等药理作用。本文针对痛风病形成过程中血清UA升高、尿酸盐(MSU)沉积、急性炎症等不同病程阶段的病理特点,结合痛风的常见临床表现,建立HUA、痛风性肾病(GN)及急性痛风性关节炎(AGAMRTX1133)3个时期的动物模型。通过评价余甘子冻干粉(PEFP)的体外抗氧化活性,探讨PEFP对HUA小鼠的降UA和肝肾保护作用,观察PEFP对GN小鼠降UA和肾脏的保护作用以及对AGA小鼠的抗炎作用,从而评估PEFP的降UA及抗痛风效果,以期为开发防治HUA和痛风的天然药物提供参考。方法:1.PEFP的体外抗氧化活性:采用FRAP法测定PEFP的铁还原能力、水杨酸法测定PEFP的羟自由基清除能力及分光光度计法测定PEFP的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)自由基清除能力。2.血UA水平升高时期:分别采用腹腔注射次黄嘌呤和氧嗪酸钾建立急性和慢性HUA小鼠模型。灌胃75、150、300 mg/kg的PEFP作为干预物质,阳性对照药物均为别嘌醇。检测小鼠血清UA、BUN、CRE水平和AST、ALT含量以及血清和肝脏组织中的XOD和ADA活性,计算肝肾系数,HE染色法观察肝肾组织的病理学特征。3.MSU沉积致肾损伤时期:采用腺嘌呤和盐酸乙胺丁醇联合灌胃建立GN小鼠模型,以别嘌醇和苯溴马隆为阳性对照药物,PEFP干预组分组情况同HUA小鼠模型,分别灌胃对应药物,21天后检测小鼠血清UA、CRE、BUN含量和血清与肝脏XOD活性水平,免疫组化法检测肾组织URAT1、GLUT9和OAT1水平,荧光定量PCR检测肾组织中URAT1、GLUT9、OAT1 mRNA表达,HE染色法观察肾组织的病理改变。4.MSU沉淀致关节炎时期:给予小鼠右踝关节注射MSU构建AGA小鼠模型,以秋水仙碱为阳性对照药物,PEFP干预组分组情况同HUA小鼠模型,药物干预第6天造模,造模后1天继续灌胃干预,并评价PEFP对AGA小鼠关节肿胀、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、SOD、MDA和NO水平的影响,免疫组化法检测小鼠关节滑膜组织中Nrf2的表达,HE染色法观察小鼠滑膜组织的病理学特征。结果:1.PEFP的体外抗氧化活性:本实验条件下各浓度的PEFP的铁还原能力均强于VC;超过一定浓度后PEhighly infectious diseaseFP的羟自由基清除能力略低于VC;PEFP表现出较好的DPPH自由基清除能力,达BI 10773抑制剂到0.8 g/L时基本与VC持平。2.血UA水平升高时期:与模型组相比,150、300 mg/kg的PEFP干预可显著降低急性HUA小鼠肝脏系数和肾脏系数,下调血清UA、BUN及CRE、AST和ALT水平,显著抑制血清和肝脏中XOD和ADA活性;75、150、300 mg/kg的PEFP能有效降低慢性HUA小鼠肝脏系数和肾脏系数,下调血清UA、BUN和ALT水平,显著抑制血清和肝脏中XOD以及血清中的ADA活性,150、300 mg/kg的PEFP能降低慢性HUA小鼠血清CRE、AST水平和肝脏中的ADA活性。病理结果提示:PEFP可改善急性和慢性HUA小鼠肝脏和肾脏的病理变化。3.MSU沉积致肾损伤时期:与模型组比较,150 mg/kg的PEFP能显著降低GN小鼠血清的UA、CRE和BUN水平及其血清和肝脏中的XOD活性。150 mg/kg的PEFP可显著下调URAT1、GLUT9和URAT1mRNA、GLUT9mRNA的表达,150、300 mg/kg的PEFP能显著上调OAT1及OAT1mRNA表达。病理结果提示:PEFP可改善GN小鼠肾脏的病理变化。4.MSU沉淀致关节炎时期:在AGA模型中,试验期间各观察时间点,相比于模型组,150、300 mg/kg的PEFP能显著改善小鼠的关节肿胀。150、300 mg/kg的PEFP可显著下调IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA和NO的水平,显著上调IL-10和SOD的水平。150 mg/kg的PEFP能显著上调Nrf2的表达。病理结果提示:PEFP可改善AGA小鼠滑膜组织的病理变化。结论:1.PEFP具有一定的体外抗氧化活性。2.PEFP能有效降低急性和慢性HUA小鼠的血清UA水平,与抑制血清和肝脏中的XOD和ADA活性及促进肾脏UA排泄有关,同时发挥了一定的肾脏和肝脏保护作用。3.PEFP可有效降低GN小鼠的血清UA水平,对GN小鼠具有肾脏保护作用,其机制为抑制血清和肝脏XOD活性,上调OAT1、OAT1mRNA,下调URAT1、GLUT9及URAT1、GLUT9 mRNA,促进UA排泄,减轻MSU的沉积。4.PEFP可有效减轻AGA小鼠的炎症反应并对其踝关节具有保护作用,其机制为抑制促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α及增加抗炎因子IL-10发挥抗炎作用,上调Nrf2、增加SOD的活性及降低MDA和NO的水平从而缓解氧化应激。