研究背景及目的:恶性血液肿瘤是一类源于造血系统的恶性克隆性疾病,其病因及发病机制复杂,恶性程度高、治疗难度大、患者生存期短,预后差,易复发及耐药形成是当今面临的难题,负性共刺激分子如TIM3、PD-1、B7-H3等在疾病的发生发展中有着重要意义,通过负性调节信号抑制机体免疫系统的免疫应答,使免疫活性降低,导致免疫逃逸发生,促使肿瘤发生发展。本研究主要通过流式细胞术检测血液恶性肿瘤患者T淋巴细胞亚群及其表面的TIM3、PD-1和原始细胞的B7-H3的表达水平,并分析其表达水平和疾病状态、临床特征、预后之间的关系,进一步探讨其在疾病发生中的作用及对疾病预后,为靶向免疫治疗恶性血液肿瘤提供理论基础。方法:(1)病例收集:选取2022年6月-2023年1月就诊于西南医科大学附属医院血液内科确诊为血液恶性肿瘤患者共88例,包括54例初诊患者,13例复发难治患者,21例完全缓解患者,收集研究对象抗凝骨髓、外周血、病历资料及患者的临床疗效,另收集22例缺铁性贫血患者外周血作为对照组。(2)采用流式细胞术测定血液系统恶性肿瘤患者骨髓T细胞亚群及表面PD-1、TIM3的表达水平,和B7-H3在原始细胞上的表达情况。(3)检测治疗前后患者外周血中细胞因子水平,分析患者免疫状态变化。(4)分析T细胞亚群及其表面的TIM3、PD-1和原始细胞的B7-H3的表达水平,并分析其表达和疾病状态、临床特征、预后之间的关系。(5)利用Excel 2007软件进行数据整理,数据分析使用SPSS 22.0软件,资料服从正态分布,用t检验,否则,使用Wilcoxon秩和检验,通过X~2检验比较组间数据,P<0.05时,认为差异有统计学意义。结果:(1)血液系统恶性肿瘤患者总人数88人,男性50例www.selleck.cn/products/repsox(57%),ZD1839临床试验女性38例(43%),发病中位年龄56(14-92)岁,髓系肿瘤患者53人(60%),包括急性髓系白血病(AML)42例,骨髓增生异常综合征(MDS)9例,原发性骨髓纤维化(PMF)2例;淋系肿瘤患者35人(40%),包括淋巴瘤(Lymphoma)18例,急性淋巴细胞白血病(ALL)13例,多发性骨髓瘤(MM)3例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)1例。(2)采用流式细胞术检测血液系统恶性肿瘤患者的骨髓T淋巴细胞上PD-1、TIM3表达情况及原始细胞的B7H3表达情况,结果显示初诊、完全缓解和未缓解组骨髓中CD4+PD1+T、CD4+TIM3+T、CD8+TIM3+T、CD8+PD1+T表达均高于对照组(P均<0.05),未缓解组和初诊组TIM3、PD1表达水平均高于完全缓解组(P均<0.05);髓系肿瘤组及淋系肿瘤组的骨髓T淋巴细胞亚群上PD-1、TIM3均高于对照组;以原始细胞上B7H3的中位表达水平5.22%为临界值,高于此水平为高表达组,否则为低表达组,初诊组高表达8例(80%),低表达2例(20%);完全缓解组高表达3例(21%),低表达11例(79%);未缓解组高表达2例(67%),低表达1例(33%),初诊组及未缓解组B7H3高表达率高于完全缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)采用流式细胞学检测血液系统恶性肿瘤患者的骨髓中T细胞亚群及其比值,初诊组、完全缓解组、未缓解组的CD4+T淋巴细胞水平均低于对照组(P均<0.05);初诊组(P<0.05)、未缓解组(P<0.05)和缓解组(P>0.05)的CD8+T淋巴细胞水平均高于对照组,初诊组、未缓解组和完全缓解组的CD4+T/CD8+T比值均低于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。(4)检测患者治疗前与治疗后的外周血细胞因子,分析患者免疫状态变化,治疗后患者IL-2、γ-干扰素水平升高,IL-4、IL-6、IL-10、α-肿瘤坏死因子水平减低(P均<0.05),提示th1/th2亚群以th1反应为主,免疫功能部分恢复,抗肿瘤效应增强。结论:(1)PD-1、TIM3及B7H3在血液系统恶性肿瘤中存在共表达,各疾病之间无明显差异,表达水平与疾病状态及预后相关,高表达提示预medical overuse后不良,PD-1、TIM3表达水平存在正相关性,各种免疫抑制分子之间存在协同表达,高表达代表免疫抑制状态,提示可能参与恶性血液病发病和复发,参与肿瘤细胞免疫逃逸,促进疾病发生发展。(2)患者T淋巴细胞亚群CD4+T/CD8+T的比率升高表明免疫功能恢复,抗肿瘤效应增强,比值的降低表明免疫功能受抑;经治疗后患者IL-2、γ-干扰素水平呈升高趋势,IL-4、IL-6、IL-10、α-肿瘤坏死因子水平呈降低趋势,th1/th2亚群以th1反应为主,提示免疫功能部分恢复,抗肿瘤效应增强,T淋巴细胞及细胞因子对于维持免疫反应平衡和加强抗肿瘤效应至关重要。