目的:非酒精性脂MLN4924作用肪肝病(Nonalcoholicfatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其它损肝因素所导致的以肝脏中脂肪过度沉积为主要特征的病理综合征,其发病机制复杂,目前尚不明确。铁死亡作为一种新的细胞死亡方式,研究发现细胞内脂质异常堆积导致的氧化还原失衡引起的铁死亡可能是加剧脂代谢紊乱的重要环节。流行病学证据发现维生素D(VD)的缺乏与NAFLD的发生率和严重程度相关,但其中的具体调节机制尚不清楚,且相关基础研究缺乏。因此,本研究以高脂饮食(High fat diet,HFD)喂养的C57BL/6J小鼠及棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导的小鼠正常肝细胞AML12作为体内、外脂肪变性模型,探究VD对NAFLD的影响及其潜在机制。方法:1.体内实验:4周龄的SPF级雄LY-188011溶解度性C57BL/6J小鼠适应性喂养一周后随机分成4组进行造模:正常对照组(CON,n=10)和正常干预组(CON+VD,n=10),给予普通饲料;模型组(HFD,n=10)和模型干预组(HFD+VD,n=10),给予高脂饲料,周期为8周。造模结束后,CON组和HFD组每周给予0.1ml玉米油腹腔注射,CON+VD组和HFD+VD组每周给予1.68 IU/gVD腹腔注射,周期为16周。试验结束后,收集小鼠的血液和肝脏样本,观察VD对NAFLD小鼠的干预效果,包括体重、肝指数、血脂、肝功能指标、肝脏脂质蓄积、氧化应激指标以及铁沉积情况。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中脂代谢相关信号分子(CD36、LPL、SREBP-1c、FAS、PPARα、CPT1)的mR NA表达情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测肝组织中VDR和铁死亡相关分子(ACSL4、TFR1、SLC7A11、GPX4)的蛋白表达水平。2.体外实验:1)取0.2m M PA及10nM1,25(OH)2D3同时处理AML12细胞24h,RT-PCR法检测肝细胞中CD36、LPL、SREBP-1c、FAS、PPARα、CPT1的mRNA表达情况;WB法检测肝细胞中VDR、ACSL4、TFR1、SLC7A11和GPX4的蛋白表达水平;3)合成si-VDR序列,借助GP-siRNA-Mate plus转染AML12细胞,检测VDR下调后AML12中CD36、LPL、SREBP-1c、FAS、PPARα、CPT1的mR NA和VDR、GPX4、SLC7A11、ACSL4和TFR1的蛋白表达水平。3.符合正态分布的计量资料以均数±标准差表示,两组之间的均数比较采用独立样本t检Intra-articular pathology验,多组之间均数比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),P<0.05认为差异有统计学意义结果:1.与HFD组相比,干预16周后HFD+VD组小鼠体重、肝指数、肝脏脂质蓄积、血脂(TC、TG、LDL-C)、肝功能指标(AST和ALT)、氧化应激指标(MDA)以及铁沉积水平均显著下降(P<0.05),HDL-C、SOD和GSH水平均显著上升(P<0.05);分子水平上,与HFD组相比,HFD+VD组小鼠肝脏中CD36、LPL、SREBP-1c和FAS的mR NA水平显著下调(P<0.05),PPARα和CPT1的mRNA水平显著上调(P<0.05);WB结果显示,与HFD组相比,HFD+VD组VDR、GPX4和SLC7A11蛋白水平显著上调(P<0.05),ACSL4和TFR1的蛋白水平显著下调(P<0.05)。2.与PA组相比,1,25(OH)2D3和PA共培养AML12细胞24h后,CD36、LPL、SREBP-1c和FAS的mRNA水平显著下调(P<0.05),PPARα和CPT1的m RNA水平显著上调(P<0.05);WB结果显示,与PA组相比,1,25(OH)2D3+PA组VDR、GPX4和SLC7A11蛋白水平显著上调(P<0.05),ACSL4和TFR1的蛋白水平显著下调(P<0.05)。3.与阴性对照组相比,si-VDR组CD36、LPL、SREBP-1c和FAS的mR NA水平显著上调(P<0.05),PPARα和CPT1的mRNA水平显著下调(P<0.05);WB结果显示,与阴性对照组相比,si-VDR组GPX4和SLC7A11蛋白水平显著下调(P<0.05),ACSL4和TFR1的蛋白水平显著上调(P<0.05)。结论:维生素D干预对HFD/PA诱导的肝损伤具有保护作用,其机制可能与VDR介导的铁死亡有关。