细粒棘球蚴囊液通过诱导细胞骨架重排抑制脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞迁移和吞噬功能

目的 探讨细粒棘球蚴囊液(EgCF)对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞骨架重排及吞噬和迁移功能的影响。方法 分离C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,分为空白对照组、 LPS组、LPS联合EgCF组。处理48 h后,罗丹明标记的鬼笔环肽染色纤维型肌动蛋selleck产品白(F-actin)结合荧光显微镜观察细胞骨架变化,Transwell~(TM)小室检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞吞噬能力。处理1 h后,WeTarget Protein Ligan抑制剂stern blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、 Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、鸟苷三磷酸-Rac1(GTP-RaPrimary Cellsc1)、 Wiskott-Aldrich综合征蛋白(WASP)及肌动蛋白相关蛋白2(Arp2)蛋白表达。结果 与对照组相比,LPS刺激后,巨噬细胞变形明显,伪足伸出增多,迁移能力和吞噬能力显著提高,F-actin增加,在伪足中分布较多,PI3K、 p-AKT、 GTP-Rac1、 WASP及Arp2蛋白表达显著增加。与LPS组相比,LPS联合EgCF组中细胞收缩变圆,伪足伸出减少,迁移能力降低,吞噬能力减弱,PI3K、 p-AKT、 GTP-Rac1、 WASP及Arp2蛋白表达均显著下降。结论 LPS诱导巨噬细胞迁移并增强其吞噬能力,EgCF处理抑制以上作用,与肌动蛋白细胞骨架重排有关。