随着饮食结构和生活习惯的改变,肥胖已成为一种全球性的流行病。通常是能量摄入与消耗不平衡的结果,导致脂肪堆积和体重增加。尽管肥胖是可以预防的,但在过去的几十年里,肥胖的人群不断增加。肥胖会对全身各个器官造成危害,并与多种疾病的发生发展有关,如高血压、心血管疾病、脑卒中和肝脏疾病。脑卒中是全世界脑血管病第二位的死亡原因,脑卒中的发病率逐年都在增加。脑卒中分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中,流行病学研究报道85%以上的脑卒中为缺血性脑卒中,脑内动脉狭窄或者闭塞造成脑组织急性血液循环障碍,主要临床表现为持久性脑功能障碍的症状和体征。缺血性脑卒中简称脑缺血,严重危害着患者健康,给家庭和社会带来沉重的经济负担。随着社会经济水平的发展,生活方式改变及人口老龄化加剧,导致脑缺血的高危人群数量也在大幅增长,在诸多高危因素中,肥胖被认为是一个重要的危险因素,通常与脑缺血共同存在。肥胖与脑缺血的关系在许多研究中被证实,在脑缺血患者中肥胖占据35.5%的人群,肥胖的患者发生脑缺血时,症状重、神经缺损明显,多为进展性脑缺血,预后较差。因此,研究肥胖患者脑缺血加重的机制,对进一步加深肥胖患者脑缺血的认识以及对疾病的控制,减少致残率和死亡率,具有重要意义。目前有关肥胖与脑缺血的研究,多为高脂肪饮食诱导的啮齿类动物模型或基因改造动物模型。已知肥胖患者血清瘦素浓度明显升高,而高水平的瘦素未能起到降低体重的作用,其原因在于肥胖者体内出现了瘦素抵抗,瘦素抵抗影响了瘦素正常生理功能的发挥使体内糖脂代谢出现紊乱。2015年,中国医学科学院实验动物研究所通过CRISPR/Cas9技术,成功建立SD背景瘦素受体基因敲除(Lepr~(-/-))大鼠。前期实验证实该Lepr~(-/-)大鼠表型稳定,幼年出现肥胖,成年后出现血糖血脂紊乱,Lepr~(-/-)大鼠是肥胖和代谢性疾病病因研究的理想可靠模型。本研究选择该大鼠作为肥胖的模型,研究其脑缺血加重的机制,为进一步研究肥胖加重脑缺血的损伤机制及治疗提供实验依据。脑缺血损伤发生机制主要有:自由基的作用、坏死区周围引发的炎症反应、兴奋性氨基酸毒性、细胞内钙超载、内皮细胞自稳态失调、细胞凋亡等。其中炎症反应在脑缺血再灌注损伤的机制中担负着重要角色。近年来,越来越多的研究表明炎性小体介导细胞焦亡在缺血性脑卒中的发病及神经功能恢复中起重要作用。脑缺血再灌注时,炎性小体被活化,促进炎症因子释放、加重炎症反应并介导细胞焦亡,导致脑缺血再灌注损伤加重。细胞焦亡是典型的促炎性程序性细胞死亡,其特征为消皮素D(gasdermin D,GSDMD)蛋白分子在细胞膜上形成孔洞,导致细胞裂解死亡,释放炎症因子。细胞焦亡的激活需要依赖半胱氨酸蛋白酶(Caspase)。人体内主要是Caspase-1/4/5,小鼠主要是Caspase-1/11。根据Caspase的类型将细胞焦亡途径分为由Caspase-1介导的经典细胞焦亡途径和由Caspase-4/5/11介导的非经典细胞焦亡途径。在经典途径中,炎性小体的组装是细胞发生焦亡的关键步骤。核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)作为研究较广泛的炎性小体,可被内、外源性危险信号激活,激活Caspase-1,从而促进炎症反应,并且诱导细胞焦亡。STAT3属于信号转导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)家族的一员,在信号转导和转录调节中发挥重要作用。STAT3与其他STAT蛋白类似,由6个结构域组成,具有四种不同的亚型。在未刺激的细胞中,STAT3是无活性的,在细胞质中以单体形式存在,一旦被各种类型的刺激激活后,磷酸化的STAT3易位到细胞核中,通过与靶基因的启动子结合启动转录。有研究显示STAT3可与NLRP3的启动子结合调控其转录,从而介导细胞焦亡。同时STAT3也是瘦素与瘦素受体结合中的关键分子,许多遗传证据表明,JAK2/STAT3信号通路在能量稳态和神经内分泌功能中发挥重要作用。肥胖可由肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNFα)、TOLL样受体4(toll like receptor 4,TLR4)和其他因子介导,这些因子可诱导炎性小体NLRP3的激活,这是各种肥胖相关疾病的关键。我们选用Lepr~(-/-)大鼠作为肥胖的动物模型,研究脑缺血后是否过度激活STAT3进而使NLRP3活化从而介导神经元焦亡。糖基化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)是由体内还原糖如葡萄糖等与蛋白质、脂质及核酸上的游离氨基发生非酶促反应,经过一系列的分子重排产生的不可逆聚合物。AGEs是一种毒性物质,以往的研究多集中在糖尿病、糖尿病肾病、阿尔茨海默病、多发性硬化等多种慢性疾病中。研究表明,AGEs发挥毒性损伤作用的病理过程一方面是AGEs本身,更重要的是通过与其相应的受体结合完成。糖基化终产物受体(recepter of advanced glycation end products,RAGE)属于细胞表面免疫球蛋白超家族多配体受体成员,生理情况下,RAGE处于低水平,当体内AGEs增多时,在AGEs的刺激下,RAGE的表达升高。近年研究发现,RAGE表达升高参与脑缺血损伤。Hong J在糖尿病肾病的研究中发现,长期给予D-核糖可通过AGEs/RAGE信号通路诱导足细胞中NLRP3炎性小体的形成和活化。已知瘦素受体敲除大鼠糖脂代谢紊乱,但是该大鼠在脑缺血再灌注后AGEs/RAGE信号通路发挥怎样的作用目前尚未知。因此,本实验立足于AGEs/RAGE通路与NLRP3介导焦亡的关系,研究瘦素受体敲除大鼠,在脑缺血后AGEs及RAGE的表达变化及该信号通路参与脑缺血损伤的可能作用机制,为进一步研究肥胖加重脑缺血的损伤机制及治疗提供基础实验依据。第一部分瘦素受体敲除加重脑缺血再灌注损伤目的:通过比较Lepr~(-/-)大鼠与同窝野生SD大鼠脑缺血再灌注损伤的差别,证明瘦素受体敲除加重脑缺血再灌注损伤。方法:1.Lepr~(-/-)大鼠表型鉴定采用Lepr~(+/-)大鼠繁殖,PCR基因鉴定筛选出纯合子(Lepr~(-/-))大鼠为模型组,野生型(wild type,WT)大鼠为对照组。4周龄进入实验,每周监测体重、摄食量、空腹血糖,持续到12周;自8周开始,每4周监测两组大鼠血脂水平,持续到12周。2.Lepr~(-/-)与同窝野生SD大鼠脑缺血再灌注损伤的差别选用8周龄的Lepr~(-/-)大鼠20只,同窝WT大鼠20只,随机分为四组(n=10),采用大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备脑缺血模型:(1)WT Sham组:暴露左侧颈总动脉,结扎近心端,结扎左侧颈外动脉,不插入线栓。(2)WT MCAO组:经左侧颈总动脉插入线栓,经颈内动脉至大脑中动脉入口,阻断血流90 min,然后将线栓拔出恢复血液灌注。(3)Lepr~(-/-)Sham组:方法同WT Sham组。(4)Lepr~(-/-)MCAO组:方法同WT MCAO组。上述各组于再灌注24 h进行神经功能评分,模型成功的大鼠断头取脑,通过TTC染色测定脑梗死体积;应用HE染色检测缺血半影区组织形态学变化。结果:1.Lepr~(-/-)大鼠的表型(1)结果鉴定:出生10天幼鼠通过PCR进行筛选:扩增出622 bp条带为WT大鼠;扩增出368 bp条带为Lepr~(-/-)大鼠;同时扩增出622 bp和3cancer immune escape68 bp两个条带为Lepr~(+/-)大鼠。(2)体重变化:与同窝WT大鼠相比,Lepr~(-/-)大鼠自4周龄开始LY2835219 molecular weight出现摄食量增多和体重增加,一直持续到12周(P<0.05);12周雄性Lepr~(-/-)大鼠平均体重471 g是WT大鼠的1.5倍(P<0.05)。(3)空腹血糖变化:与同窝WT大鼠相比,Lepr~(-/-)大鼠空腹血糖自4周时开始升高,持续到12周,具有统计学差异(P<0.05)。(4)血脂变化:8周龄Lepr~(-/-)大鼠甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白增高显著,分别是WT大鼠的5倍、1.5倍、1.5倍(P<0.05)。血脂紊乱持续到12周。2.Lepr~(-/-)大鼠与同窝WT大鼠脑缺血再灌注损伤比较神经功能评分显示,脑缺血后Lepr~(-/-)大鼠评分高于同窝WT大鼠(P<0.05);TTC染色结果显示,脑缺血后Lepr~(-/-)大鼠梗死体积大于同窝WT大鼠(P<0.05);HE染色结果显示,脑缺血后Lepr~(-/-)大鼠神经元形态不完整,细胞变形,核固缩,正常神经元显著减少,与同窝WT大鼠相比,神经元损伤更明显。小结:1.Lepr~(-/-)大鼠具有肥胖、高摄食量、血糖血脂异常等表型特征,可以作为肥胖的理想动物模型。2.瘦素受体敲除后可加重脑缺血再灌注损伤。第二部分STAT3-NLRP3介导焦亡参与Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注损伤目的:探索Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡的相关机制方法:1.生物信息学分析使用GEO数据集GSE163614和GSE97537,进行差异基因分析,对两个数据集的差异基因取交集,进行GO分析和KEGG通路富集分析,使用ggplot2包进行可视化。通过String数据库进行PPI网络图绘制,之后使用cytoscape的MCODE插件分析整PPI网络,识别最重要的cluster和19个节点基因。根据文献结果得到细胞焦亡相关基因共153个,与19个节点基因取交集,得到5个细胞焦亡相关的节点基因。通过String数据库查询Lepr相关蛋白,将网络图里的11个基因与5个细胞焦亡相关的节点基因取交集,得到基因STAT3,用于后续研究。2.观察瘦素受体敲除对脑缺血再灌注后STAT3 m RNA水平的影响选用8周龄的Lepr~(-/-)大鼠10只,同窝WT大鼠10只,随机分为四组(n=5),采用MCAO制备脑缺血模型:(1)WT Sham组;(2)WT MCAO组;(3)Lepr~(-/-)Sham组;(4)Lepr~(-/-)MCAO组。应用q RT-PCR检测STAT3 m RNA的表达。3.观察瘦素受体敲除对脑缺血再灌注后NLRP3、神经元焦亡的影响选用8周龄的Lepr~(-/-)大鼠30只,同窝WT大鼠30只,随机分为四组(n=15),采用MCAO制备脑缺血模型:(1)WT Sham组;(2)WT MCAO组;(3)Lepr~(-/-)Sham组;(4)Lepr~(-/-)MCAO组。上述各组于再灌注24 h行神经功能评分,模型成功大鼠断头取脑,应用Western blot检测缺血皮层半影区组织NLRP3、Pro-caspase1、Cleaved caspase1、GSDMD、GSDMD-N、Mature IL-18、Mature IL-1β的蛋白表达;应用q RT-PCR检测NLRP3、GSDMD m RNA的表达;应用免疫荧光双标检测皮层半影区组织NLRP3、GSDMD在神经元的表达;透射电镜检测缺血半影区神经元的细胞膜孔道数量。4.抑制NLRP3对Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡的影响选用8周龄Lepr~(-/-)大鼠30只,随机分为三组(n=10),采用MCAO制备脑缺血模型:(1)Lepr~(-/-)MCAO组。(2)DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组:造模前1 h,经尾静脉注入同体积溶媒,然后进行缺血再灌注。(3)MCC950+Lepr~(-/-)MCAO组:造模前1 h,经尾静脉注入MCC950(5 mg/Kg),然后进行缺血再灌注。上述各组于再灌注24 h进行神经功能评分;模型成功的大鼠断头取脑。Western blot检测缺血皮层半影区组织Pro-caspase1、Cleaved caspase1、GSDMD、GSDMD-N、Mature IL-18、Mature IL-1β蛋白的表达;免疫荧光双标检测缺血皮层半影区神经元中GSDMD的表达;HE染色检测缺血半影区神经元形态学变化。结果:1.生物信息学分析将两个差异基因集取交集后,共得到196个基因在两个数据集中均具有差异性表达。GO分析和KEGG通路富集结果对196个差异基因分析结果显示,参与生物过程的通路与细胞焦亡及炎症相关。通过PPI网络找到最重要的19个节点基因,并将此19个节点基因再次进行GO分析和KEGG富集分析,结果显示这19个节点基因与细胞焦亡及炎症均有密切关系,通过文献查询得到153个焦亡相关基因,将19个节点基因与153个细胞焦亡相关基因取交集,得到5个细胞焦亡相关的节点基因。基于String数据图得到Lepr相关蛋白网络,此网络共包含11个蛋白基因,与上述5个细胞焦亡相关的节点基因取交集,得到STAT3,此蛋白基因是焦亡相关的节点基因,并且与Lepr表达相关,因此选择此基因用于后续研究。2.观察Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注损伤STAT3 m RNA水平的变化q RT-PCR结果显示:与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组STAT3 m RNA水平表达下降(P<0.05);与WT Sham组相比,WT MCAO组STAT3 m RNA水平表达明显升高(P<0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组STAT3 m RNA水平升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组STAT3 m RNA水平升高不明显(P<0.05)。3.观察瘦素受体敲除对脑缺血再灌注后NLRP3表达、神经元焦亡的影响Western blot结果显示:与WT Sham组相比,WT MCAO组NLRP3及焦亡相关蛋白(Pro-caspase1、Cleaved caspase1、GSDMD、GSDMD-N、Mature IL-18、Mature IL-1β)表达升高(P<0.05);与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组NLRP3及焦亡相关蛋白表达无差异(P>0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组NLRP3及焦亡相关蛋白表达明显升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组NLRP3及焦亡相关蛋白表达进一步升高(P<0.05)。q RT-PCR结果显示:与WT Sham组相比,WT MCAO组NLRP3与焦亡蛋白GSDMD在m RNA水平表达升高(P<0.05);与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组NLRP3与GSDMD在m RNA水平表达无差异(P>0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组NLRP3与GSDMD m RNA水平表达升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组NLRP3与GSDMD m RNA水平表达显著升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示:与WT Sham组相比,WT MCAO组神经元的NLRP3、GSDMD荧光强度增高(P<0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组神经元的NLRP3、GSDMD荧光强度表达明显升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组神经元的NLRP3、GSDMD荧光强度进一步升高(P<0.05)。透射电镜结果显示:与WT Sham组相比,WT MCAO组半影区神经元肿胀,细胞膜出现孔道;与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组半影区神经元出现明显肿胀,细胞膜孔道数量增多;与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组神经元损伤重,细胞膜孔道数量明显增多,细胞焦亡明显。上述结果表明,瘦素受体敲除使脑缺血再灌注后炎性小体NLRP3激活程度加重,导致神经元焦亡损伤加重。4.抑制NLRP3对Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡的影响Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注24 h的神经功能评分结果显示:与DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组相比,MCC950+Lepr~(-/-)MCAO组神经功能评分显著下降(P<0.05)。Western blot结果显示:与DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组相比,MCC950部分阻断Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后Pro-caspase1、Cleaved caspase1、GSDMD、GSDMD-N、Mature IL-18、Mature IL-1β蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,焦亡相关蛋白表达无明显差异(P>0.05)。免疫荧光结果显示:与DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组相比,MCC950明显降低了Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元GSDMD荧光强度(P<0.05);DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,神经元GSDMD荧光强度无明显差异(P>0.05)。HE染色结果显示:与DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组相比,MCC950处理后减轻了神经元损伤,变形、坏死神经元减少(P<0.05);DMSO+Lepr~(-/-)MCAO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,两组均观察到大量的神经元细胞质浓缩,核固缩、分裂或溶解,神经元损伤无明显差异(P>0.05)。小结:Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注损伤可能通过激活STAT3进而使NLRP3活化介导神经元焦亡。第三部分AGEs/RAGE信号通路通过NLRP3介导Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡目的:探索AGEs/RAGE信号通路能否通过NLRP3介导Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡。方法:1.观察Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后AGEs、RAGE的表达变化选用8周龄的Lepr~(-/-)大鼠30只,同窝WT大鼠30只,随机分为四组(n=15),采用MCAO制备局脑缺血模型:(1)WT Sham组;(2)WT MCAO组;(3)Lepr~(-/-)Sham组;(4)Lepr~(-/-)MCAO组。以上各组于再灌注24 h行神经功能评分,模型成功大鼠断头取脑,应用Western blot法检测大鼠脑缺血皮层半影区组织AGEs、RAGE蛋白表达;免疫组化检测皮层半影区神经元RAGE蛋白表达;q RT-PCR检测RAGE m RNA表达变化。2.AGEs/RAGE信号通路对Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后NLRP3及神经元焦亡的调控选用8周龄Lepr~(-/-)大鼠30只,随机分组如下(n=10),采用MCAO制备局脑缺血模型:(1)Lepr~(-/-)MCAO组。(2)Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组:分别于再灌注后5 min及1 h,经腹腔注入同体积溶媒,其余操作同Lepr~(-/-)MCAO组。(3)Lepr~(-/-)MCAO+FPS-ZM1(5 mg/kg)组:分别于再灌注后5min及1h,经腹腔注入FPS-ZM1(5 mg/Kg),其余操作同Lepr~(-/-)MCAO组。上述各组于再灌注24 h进行神经功能评分;模型成功的大鼠断头取脑,Western blot检测脑缺血皮层半影区组织NLRP3及Pro-caspase1、Cleaved caspase1、GSDMD、GSDMD-N、Mature IL-18、Mature IL-1β蛋白的表达;免疫荧光双标检测皮层半影区组织神经元NLRP3、GSDMDGSI-IX的荧光强度;HE染色检测脑缺血半影区神经元形态学变化。结果:1.观察Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后AGEs、RAGE的表达变化Western blot的结果显示:与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组AGEs及RAGE蛋白表达升高(P<0.05);与WT Sham组比较,WT MCAO组AGEs、RAGE蛋白表达明显升高(P<0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组AGEs、RAGE蛋白表达显著升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组AGEs、RAGE蛋白表达进一步升高(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示:WT Sham组神经元中有少量RAGE表达,可见少量棕黄色颗粒;与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组神经元中RAGE表达增多,阳性细胞深染(P<0.05);与WT Sham组相比,WT MCAO组缺血半影区RAGE表达明显,阳性细胞深染,表达明显升高(P<0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组神经元RAGE表达显著升高(P<0.05);与WT MCAO组比较,Lepr~(-/-)MCAO组神经元RAGE表达进一步升高(P<0.05)。q RT-PCR结果表明:与WT Sham组相比,Lepr~(-/-)Sham组RAGE m RNA水平表达升高(P<0.05);与WT Sham组相比,WT MCAO组RAGE m RNA水平表达明显升高(P<0.05);与Lepr~(-/-)Sham组相比,Lepr~(-/-)MCAO组RAGE水平表达显著升高(P<0.05);与WT MCAO组相比,Lepr~(-/-)MCAO组RAGE m RNA水平表达进一步升高(P<0.05)。此结果与Western blot结果一致。2.AGEs-RAGE信号通路对Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后NLRP3及神经元焦亡的调控Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注24 h的神经功能评分结果显示,与Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组相比,Lepr~(-/-)MCAO+FPS-ZM1组神经功能评分显著下降(P<0.05)。Western blot结果表明:与Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组相比,FPS-ZM1抑制了Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后缺血半影区炎性小体NLRP3、焦亡相关蛋白的表达(P<0.05);Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,NLRP3、焦亡相关蛋白表达无差异(P>0.05)。免疫荧光结果显示:与Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组相比,FPS-ZM1降低了Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元NLRP3及GSDMD的荧光强度(P<0.05);Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,神经元的NLRP3、GSDMD荧光强度无差异(P>0.05)。HE染色结果显示:与Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组相比,Lepr~(-/-)MCAO+FPS-ZM1组神经元损伤减轻,变形、坏死神经元减少(P<0.05)。Lepr~(-/-)MCAO+DMSO组与Lepr~(-/-)MCAO组相比,两组的神经病理表现无明显差异,大脑的缺血半影区中均能观察到浓缩的细胞质,核固缩、分裂或溶解,细胞排列紊乱。小结:1.瘦素受体敲除可激活AGEs/RAGE信号通路。2.AGEs/RAGE信号通路通过NLRP3介导Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡。结论:1.瘦素受体敲除介导脑缺血再灌注损伤加重。2.Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注损伤可能通过激活STAT3进而使NLRP3活化介导神经元焦亡。3.AGEs/RAGE信号通路通过NLRP3介导Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注后神经元焦亡。以上结果表明,Lepr~(-/-)大鼠作为肥胖的动物模型,可加重脑缺血再灌注损伤,AGEs/RAGE信号通路通过NLRP3调控神经元焦亡介导Lepr~(-/-)大鼠脑缺血再灌注损伤。