研究背景由结核分枝杆菌(Mtb)引起的结核病一直以来对于全球公共卫生系统而言都是严重的挑战,在世界范围内导致了严重的发病率和死亡率。巨噬细胞作为Mtb的主要栖息场所在抗结核感染中有着不可撼动的地位,而IFN-γ信号对于巨噬细胞激活清除Mtb至关重要。许多临床SCH772984说明书研究已经证明了 IFN-γ对结核病(包括耐多药结核病)的有效性,且改善了对一线抗结核用药治疗反应差的患者的巨噬细胞活性,加速患者的康复。干扰素诱导的干扰素刺激基因(ISGs)已被证实除了有广泛的抗病毒作用外,还具有抗真菌和细菌的效应。Viperin作为最易诱导的ISGs之一,前期课题组研究发现在巨噬细胞中Viperin能抑制宿主免疫反应促进Mtb感染,但Viperin与IFN-γ产生及其对Mtb感染之间的关系以及机制还有待研究。研究方法1.qRT-PCR和Westernblot检测Rsad2+/+小鼠和Rsad2-/-小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中Viperin的表达;2.CFU检测Viperin对BMDM中Mtb感染的影响;3.qRT-PCR和ELISA检测Viperin对不同时间以及不同感染复数感染Mtb的BMDM中IFN-α、IFN-β和IFN-γ产生的影响;4.IHC检测小鼠Mtb感染后肺脏和脾脏巨噬细胞中Viperin对IFN-γ表达的影响5.CFU检测IFN-y antibody预处理后Viperin对BMDM中Mtb感染的影响;6.Western Blot 检测 Mtb短时间感染的 BMDM 中TBK1/IKK-ε、IRF3、JAK1、STAT1信号通路的变化情况;7.qRT-PCR和 ELISA 检测上述相关通路对应抑制剂(BX-795、BAY-985、Abrocitinib、8.Fludarbine预处理后Mtb感染BMDM中IFN-γ的产生水平;9.CFU 检测述相关通路对应抑制剂(BX-795、BAY-985、Abrocitinib、Fludarabine)预处理后Viperin对BMDM中Mtb感染的影响;10.Western Blot 检测中和 IFN-γ 后 Viperin 对 Mtb 感染的 BMDM 中 JAKselleckchem1 和 STAT1信号通路变化情况;11.Confocol检测感染Mtb的BMDM中Viperin对STAT1信号通路入核的影响;12.在Rsad2-/-小鼠的BMDM中与INH合用检测其对Mtb的抑菌效应。研究结果1.Mtb感染促进BMDM中Viperin mRNA以及蛋白的表达;2.Viperin促进BMDM胞内Mtb的感染;3biologic agent.Viperin不影响IFN-α、IFN-β的产生,但通过抑制IFN-γ的产生发挥促菌效应;4.Viperin通过TBK1/IKK-ε信号通路抑制BMDM中IFN-γ的产生促进Mtb感染5.Viperin通过IRF3信号通路抑制BMDM中IFN-γ的产生促进Mtb感染;6.Viperin通过JAK1-STAT1信号通路抑制BMDM中IFN-γ的产生促进Mtb感染;7.Viperin抑制Mtb感染的BMDM中p-STAT1的入核;8.Viperin通过直接或间接的途径调控JAK1-STAT1信号通路;9.INH增强Rsad2-/-小鼠BMDM的抑菌效应。结论本研究证实了在BMDN中Mtb诱导的Viperin可以通过TBK1/IKK-ε-IRF3和JAK1-STAT1信号通路轴抑制IFN-γ的表达从而促进胞内Mtb感染,并与INH合用具有更高的疗效,这项研究给临床治疗多重耐药性结核病提供了崭新的思路和靶点。