METTL14介导的m~6A甲基化修饰Snail-1蛋白对食管癌细胞侵袭和上皮间质转化特性的影响

目的:探讨METTL14介导的m~6A甲基化修饰Snail-1蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)侵袭和上皮间质转化(EMT)中的影响和作用机制。方法:通过GEPIA分析ESCC患者METTL14的表达情况及对其生存期进行评估;实验分为si-NC组和si-METTL14组;qPCR检测METTL14基因的表达;Western blot检测Snail-1和EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达;TranswellEtoposide抑制剂实验检测细胞侵袭能力;MeRIP-qPCR检测m~6A修饰Snail-1的水平;加入放线菌素D(actinomycin D)检测Snail-1 mRNA稳定性。结果:ESCC患者和细胞系中METTL14的表达显著升高(P<0.01);METTL14高表达患者的生存期明显缩短(P<0.01)。si-METTL14组中METTL14 mRNA和蛋白的表达水平都显著降低(P<0.01);E-cadherin表达显著上升(P<0.01),而N-cadherin和Vimentin的表达显著降低(P<0.01);细胞侵袭个数明显减少(P<0.01)。进一步发现,si-METTL14转染显著下调Snail-1的mRNA和蛋白水平(P<0.01),且显著降低m~6A Snail-1水平(P<0.01)以及Snail-1 mRNA的稳定性(P<0.01)。Snail-1拯救实验证明与si-METTL14+OE-NC组相比,si-METTBiochemical alterationL14+OE-Snail-1组中E-cadherin的表达显著降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的表达显著升高(P<0.01)。结论:在ESCC细胞中,METTL14和Snail-1的表达均上调;敲低METTL14可显著降低Snail-1 mRNA的稳定性,而减少其表达,从而抑制ELEE011体内实验剂量SCC细胞侵袭和EMT过程。