背景:急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是一种伴随表观遗传突变现象的T细胞恶性血液肿瘤。该疾病进展迅速,复发率高,预后差。目前T-ALL的临床主要治疗方式有化疗和干细胞移植等,而传统的化疗可能导致T-ALL复发与预后不良,因此迫切需要寻找新的靶向治疗药物。DNA羟甲基酶TET1在T-ALL患者中高表达,并且是T-ALL细胞生长所必需的。研究表明,TET1蛋白表达或功能失调可导致急性淋巴或髓系细胞白血narcissistic pathology病的发生。因此TET1是T-ALL的潜在治疗靶点。金诺芬是一种含金类化合物,在1985年被FDA初步批准用于治疗类风湿关节炎,近十年间被发现对慢性淋巴细胞https://www.selleck.cn/products/empagliflozin-bi10773.html白血病、卵巢癌、小细胞肺癌和乳腺癌等有较强的抗肿瘤活性。本研究旨在探究金诺芬在T-ALL中的抗肿瘤活性以及联系表观遗传相关分子TET1的具体抗癌机制,为T-ALL提供新的靶向治疗药物。方法:我们利用CCK-8增殖实验对FDA批准的药库进行高通量筛选,筛选对T-ALL细胞杀伤性强的药物,最终筛选出金诺芬作为候选药物,研究其在抑制T-ALL发展中的作用。我们通过分析金诺芬给药前后转录组(RNA-seq)变化筛选出金诺芬潜在的靶向分子;通过5hmC-seq、WGBS、Dot-blot检测金诺芬给药后T-ALL细胞基因组整体5hmC和5m C水平变化;通过SPR、HPLC检测金诺芬与TET1的亲和力及对其酶活性影响;通过对生物信息合并分析确定下游基因通路;利用Western blot、RT-qPCR对下游基因和通路验证分析。结果:本研究发现,金诺芬通过直接靶向TET1并抑制其酶活性的方式,降低T-ALL细胞整体基因组5hmC水平并抑制T-ALL细胞生长,有效地抑制TALL进展。进一步研究发现,金诺芬抑制TET1会导致c-Myc基因5hmC水平下降,甲基化水平增加,c-Myc转录翻译减少。同时c-Myc表达的减少反过来影响TET1蛋白稳定性,下调TET1蛋白表达,形成一个负调控环路,介导T-ALL细胞死亡。结论:本研究发现金诺芬可寻找更多以作为TET1活性抑制剂的一种新应用,揭示了将DNA表观遗传相关基因TET1与原癌基因c-Myc的一个负调控环路,阐明了TET1/5hmc/c-Myc信号通路在金诺芬杀伤T-ALL细胞中的作用机理,本研究结果将为T-ALL的临床治疗及靶向药物的开发提供新的思路。