目的:探讨肾阳亏虚证泄泻小鼠模型的构建方法,建立肾阳亏虚证泄泻小鼠模型,研究四神丸水煎液干预肾阳亏虚证泄泻肾肠损伤过程中的肠道微生态机制。方法:以SPF级昆明雄性小鼠为本研究对象,(1)采用不同剂量腺嘌呤New bioluminescent pyrophosphate assay混悬液灌胃,检测小鼠能量代谢、性功能、脏器指数、肾脏结构及功能、结肠结构、氧化应激、肠道内容物菌群等指标。(2)采用不同剂量及天数腺嘌呤混悬液联合番泻叶水煎液灌胃,检测小鼠肾脏结构及功能、肠道内容物酶活性、微生物活度等指标。(3)采用腺嘌呤混悬液联合番泻叶水煎液构建肾阳亏虚证泄泻模型,以四神丸水煎液干预,检测小鼠脏器指数、肾脏结构、能量代谢等指标。(4)在方法(3)肾阳亏虚证泄泻模型造模成功后检测小鼠肾功能、炎症反应、肠道内容物菌群、SCFAs等指标。(5)在方法(3)四神丸水煎液干预后检测小鼠肾功能、炎症反应、肠道内容物菌群、SCFAs等指标。结果:(1)与NC组相比,NMM组小鼠血清cAMP含量降低(P<0.05),cGMP升高(P<0.05),cAMP/cGMP降低(P<0.05)。血清T、E_2含量降低(P<0.05;P<0.05),血清Cr、BUN含量升高(P<0.01;P<0.01)。肾脏MDA含量增加(P<0.01),SOD减少(P<0.01),肾脏及结肠结构损伤明显。不同剂量腺嘌呤灌胃后小鼠出现不同特征菌群的富集。(2)与同期C组相比,M2组小鼠体重降低(P<0.05),BUN含量降低(P<0.05),血清Cr升Bemcentinib配制高(P<0.05),肠道内容物乳糖酶降低(P<0.01),蔗糖酶、微生物活度升高(P<0.01;P<0.01)。(3)与同期CC组相比,CM组小鼠体重及肛温降低(P<0.01;P<0.01),腹泻指数升高(P<0.01)。血清cAMP含量降低(P<0.01),cGMP升高(P<0.01),cAMP/cGMP降低(P<0.01),肾脏结构损伤明显。与同期CX组相比,CS组小鼠体重和肛温改变(P>0.05;P>0.05),腹泻指数降低(P<0.01)。血清中cAMP含量、cGMP含量、cAMP/cGMP发生改变(P>0.05;P>0.05;P>0.05),肾脏结构损伤减轻。(4)CM组小鼠肠道内容物特征菌种Lactobacillus intestinalis、Bacteroides acidifaciens富集。造模后抑制了小鼠肠道内容物中SCFAs(P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.01),并引起血清中Cr、BUN、IL-6、TNF-α及结肠组织中s Ig A含量的变化。Lactobacillus intestinalis、Bacteroides acidifaciens与乙酸显著负相关,与Cr呈正相关,与IL-6、BUN呈负相关。(5)CS组小鼠肠道内容物特征菌种Lactobacillus johnsonii富集,SCE7080浓度FAs发生变化。小鼠血清Cr含量呈降低趋势(P>0.05),BUN呈上升趋势(P>0.05),IL-6和TNF-α含量降低(P<0.01;P<0.05),结肠组织s Ig A升高(P<0.01)。Lactobacillus johnsonii、SCFAs与IL-6、TNF-α、s Ig A间存在相关性。结论:(1)50 mg/(kg·d)腺嘌呤灌胃14 d可成功构建肾阳亏虚证小鼠模型。(2)50 mg/(kg·d)腺嘌呤灌胃14 d并联合10 g/(kg·d)番泻叶灌胃7 d能够明显造成小鼠肾肠功能损伤。(3)50 mg/(kg·d)腺嘌呤灌胃14 d联合10 g/(kg·d)番泻叶灌胃7 d可成功构建肾阳亏虚证泄泻小鼠模型。(4)肾阳亏虚证泄泻能够改变小鼠肠道内容物菌群结构和功能,抑制SCFAs,损伤肾脏结构和功能,激活肠道炎症反应。特征菌种Lactobacillus intestinalis、Bacteroides acidifaciens与SCFAs、肠道炎症、肾功能间的相互作用可能是肾阳亏虚证泄泻肾肠损伤的作用机制。(5)四神丸水煎液可引起肾阳亏虚证泄泻小鼠肠道内容物菌群结构及功能的变化,促进丙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸的合成,抑制肠道炎症反应,改善肾脏结构及功能的损伤。特征菌种Lactobacillus johnsonii与丙酸、肠道炎症反应、肾功能间的相互作用可能是四神丸治疗肾阳亏虚证泄泻的作用机制。