目的:类风湿关节炎(RA)是一种以进行性关节破坏为特征的自身免疫病,常常表现为多发小关节的对称性肿痛,至今病因未明。RA病情评估复杂。该病累及关节的同时,还可累及肺、血液系统、肾脏等多系统。现阶段RA治疗效果不尽如人意的Dynamic membrane bioreactor重要原因之一是无法精准评估疾病的活动/缓解,且无法精准判断RA的器官受累,导致RA的治疗时机难以把控。目前临床中常用的疾病活动评估包括DAS28,CDAI,SDAI,Boolean缓解等,由于纳入较多患者或医生主观因素,因此存在评估偏移。故筛选具有评估RA病情活动/缓解及器官受累作用的生物标志物,建立更为准确和客观的的疾病活动判定模型仍是RA当前研究的一大热点。本研究中首先对北京大学人民医院收治的196例RA患者人口学特征、临床常见检查结果进行分析,总结不同疾病活动度和器官受累患者的临床及免疫学特征。而后在发现队列中检测前期实验结果及数据库中筛选可能与RA病情活动及关节外表现相关的细胞因子,进一步在验证队列中验证筛选出的与RA病情活动相关的细胞因子。以及评估RA患者关节外表现相关的细胞因子的作用。最后结合现有临床常见指标建立RA病情活动的评估模型。方法:第一部分:通过回顾性及前瞻性地收集住院及门诊较为完整的196例RA患者临床病历资料,记录RA患者人口学特征、临床实验室检查结果等,分析RA患者亚组及合并关节外表现的临床特点。第二部分:发现队列纳入RA患者72例,通过多因子及ELISA检测RA患者血清中的25个细胞因子:S100A8、IL-1 beta/IL-1F2、IL-1ra/IL-1F3、TNF-α、IL-6、IL-8/CXCL8、IFN-β、CXCL13/BLC/BCA-1、IFN-γ、Dkk-1、IL-17/IL-17A、RAGE/AGER、S100A9、SOST/Sclerostin、M-CSF、Leptin/OB、CCL23/MPIF-1、Progranulin/PGRN、IFN-α、IL-21、GM-CSF、CXCL10/IP-10/CRG-2、s CD25、LBP、SRA,并在验证队列中验证筛选出的与RA疾病活动相关的细胞因子。PD-0332991体内实验剂量第三部分:评估检测的25个细胞因子在指示RA关节外表现/系统受累中的意义。第四部分:验证队列RA患者中,筛选的与RA病情活动相关的细胞因子结合结合现有临床常见指标建立RA疾病活动预测模型。结果:第一部分:根据DAS28评分从高到低,将RA分为4组,1组DAS28评分最高。通过比较不同疾病活动度组中RA患者临床实验室特征发现:关节肿痛数、ESR、CRP、RF、CCP均与RA病情活动相关。除了疾病活动度,还主要分析了RA关节外表现的危险因子和预测因子。相比于无关节外表现组,RA合并类风湿结节患者中RF、CCP、HRF-Ig G以及GPI水平明显偏高,且CCP水平升高是独立危险因素;与此类似,同时分析了RA合并肺间质病变、肾脏累及、血液系统受累、合并感染、合并代谢紊乱的独立危险因素,但并未发现与已知的传统危险因素不同的新的线索。第二部分:通过查阅文献,从1000余篇细胞因子相关的文献中筛选了可能与RA疾病活动度及关节外表现高度相关的因子,外加本课题组前期工作中发现的高度相关的因子共25个。本部分结果发现RA患者血清IL-6、S100A9、IFN-α、s CD25、SRA水平与疾病活动DAS28-ESR评分呈正相关,而LBP呈负相关。并在验证队列RA患者中得到了进一步验证。且RA患者不同疾病活动度分组(1-4组)中,SRA、LBP、IL-6、s CD25、GM-CSF水平随着RA疾病活动度降低明显下降,且与DAS28评分呈正相关关系;RAGE/AGER水平随着RA疾病活动度降低明显上升,且与DAS28评分呈负相关关系,可能是保护因素。在ESR、CRP均阳组中,SRA、LBP、IL-6三个因子的阳性率高(在95.0%左右),而在ESR、CRP均阴组中,LBP的阳性率最高为85.5%,IL-6、SRA的阳性率也较高,为75.0%,该结果提示,在血沉CRP均阴性,而疾病活动度仍高的患者中,LBP,IL-6和SRA可能具有对疾病活动的提示意义。在RF、CCP均阳组中,LBP、SRA、IL-6的阳性率和绝对值都较高[98(93.3%)、94(89.5%)、89(84.9%)];在CCP单阳以及RF单阳性的RA患者中,LBP和IL-6阳性率仍然最高(均为100%);在RF、CCP均阴性组中,LBP的阳性率最高,为100.0%,而IL-6阳性率则明显降低。上述结果提示,LBP、SRA和IL-6对疾病活动的提示意义较高,无论CCP抗体和RF阳性或阴性,LBP的提示意义都高,但IL-6只在抗体阳性组中对疾病活动度的提示意义较高。第三部分:RA患者关节外表现方面,合并类风湿结节亚组患者IFN-β及SRA水平明显升高,Dkk-1、Leptin/OB水平则明显偏低;合并肺间质病变亚组患者IL-1beta/IL-1F2、IL-1ra/IL-1F3、IFN-γ、IL-17/IL-17A及s CD25水平明显偏高,而RAGE/AGER、Leptin/OB水平则明显偏低,通过进一步的多因素分析,在各关节外表现组中,s CD25是RA肺间质病变的独立危险因素,RAGE/AGER似乎是保护性因素;合并肾脏累及的亚组患者IL-21水平明显偏高。合并血液系统累及的亚组患者IL-6、CXCL13/BLC/BCA-1、M-CSF、Progranulin/PGRN、GM-CSF水平明显偏高;合并感染亚组中S100A9水平明显偏高;合并代谢紊乱的亚组患者DKK-1水平明显偏高。第四部分:在验证队列中验证了上述细胞因子与RA疾病活动的相关性,并利用与RA疾病活动独立相关的因子联合临床指标及急性时相反应物(血沉和CRP),基于Logistic回归及BP神经网络建立疾病活动预测模型,Logistic回归预测最终纳入s CD25、M-CSF、ESR、低密度脂蛋白、肿胀关节数这五个指标。模型预测准确率分别为78.9%。ESR、肿胀关节数、M-CSF联合检测的AUC最大为0.897。BP神经网络纳入上述5个参数,模型准确率78.4%。AUC在RA疾病活动增减组中均为0.864,构建的模型较好。结论:1.肿痛关节数、ESR、CRP、RF、CCP均与RA病情活动有关。2.RA的疾病活动度与多种细胞因子的升高相关,包括IL-6、S100A9、IFN-α、s CD25、SRA、LBP。这些细胞因子对RA患者疾病活动存在提示意义;3.s CD25、RAGE/AGER与RA患者合并肺间质病变相关,可能是RA出现ILD的预测因子;4.在ESR、CRP均阴性且疾病活动度仍高的RA患者中,LBP,IL-6和SRA可能具有对疾病活动的提示意义;5.基于Logistic回归及BP神经网络建立RA患者疾病活动预测模型,纳入s CD25、M-CSF、ESR、低密度脂蛋白、肿胀关节数这五个指标为评判指标,该模型可能成为RAGDC-0973临床试验疾病活动度的客观评估模型。