临床数据显示炎症是人类疾病中最常见的病理过程,许多疾病的发生与发展都与炎症有关,如肿瘤、心血管疾病、自身免疫病等。目前临床上常用的抗炎药物作用主要为非甾体类抗炎药和甾体类抗炎药。其中,甾体类具有较更多强的抗炎镇痛作用,但是其严重的副反应使其应用受到较大的限制。环氧化酶抑制剂是非甾体类抗炎药物的主要组成部分之一。该类药物主要副反应为胃肠道反应、中枢神经系统和心脑血管不良事件等。由此可见,目前抗炎靶点单一、药物毒副作用大是抗炎药物面临的主要问题。因此,寻找新的抗炎靶点,发现高效安全的抗炎药物显得尤为重要。Toll样受体2(TLR2)作为重要的模式识别受体,调节机体的固有免疫和获得性免疫以维持内环境的稳态。目前研究表明,TLR2的过度活化与类风湿性关节炎,系统性红斑狼疮,阿尔兹海默病等相关。因此,TLR2抑制剂有望成为新的炎症治疗靶点。然而,目前报道的TLR2抑制剂种类较少、活性欠佳、结构不稳定等缺点,严重限制其在临床研究中的应用。因此,本论文主要围绕开发新型TLR2小分子抑制剂,诠释其抗炎机制,构建炎症模型验证抗炎效果进行研究,所做的工作主要有以renal cell biology下:1、通过细胞活性筛选从2100天然产物中发现阿朴酚类生物碱Taspine具有显著的TLR2抑制活性。通过10步的方法全合成Taspine并开展构效关系研究得到了衍生物SMU-Y6。2、SMU-Y6较Taspine具有更好的TLR2抑制活性,ICs0约为0.11±0.04μM,水溶性提高约20倍,毒性降低。研究表明SMU-Y6选择性作用于TLR2而非其他TLRs,减少炎症因子的释放,如TNF-α、IL-6、IL-1β等。3、体外抗炎机制研究表明,SMU-Y6减少TLR2对髓样分化因子88(MyD88)的招募,减少 p-65、p-38、IKKα/β、ERK1/2 的磷酸化,减少 IKBα的降解,从而阻断NF-κB和MAPK信号通路,最终导致炎症因子的释放减少。此外,SMU-Y6抑制M0型巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞。4、在体内小鼠的脚掌肿胀模型和结肠炎模型中,SMU-Y6能显著减少局部炎症组织中的中性粒细胞浸润,减少M1型巨噬细胞的极化以及炎症因子的产生发挥抗炎作用。药代动力学研究和体内安全性评价显示SMU-Y6有较长的体内半衰期、较高的生物利用度和较低的体内毒性,有望成为一款安全长效的抗炎药物。综上所述,本研究通过对天然产物Taspine进行结构优化,获得了一个活性更优、水溶性更好、毒性较小、对TLR2具有选择性的先导化合物SMU-Y6,并验证其通过阻断TLR2/MyD88/NF-κB和MAPK信号通路减少炎症因子的产生和抑制巨噬细胞的极化和中性粒细胞浸润产生抗炎作用。本课题为TLR2小分子抑制剂提供了一个结构新颖、活性较优、成药CHIR-99021性较好的候选分子,为TLR2抑制剂潜在的抗炎机制提出了见解。