成纤维生长因子19稳定敲减对大肠癌细胞增殖、迁移的影响

目的:构建慢病毒稳定敲减FGF19大肠癌细胞系，探究FGF19敲减对人大肠癌细胞增殖、迁移的影响。方法:通过慢病毒转染大肠癌COLO201和HCT1Median sternotomy16细胞，分别在适宜病毒转染指数条件下转染并构建稳转株；以嘌呤霉素进行筛选，获得稳定敲减FGF19的细胞株；PCR和Western bloting鉴定COLO201和HCT116稳转细胞株中FGF19的表达情况；Transwell实验检测细胞的迁移活性，CCK-8和克隆形Compound 3 MW成实验检测细胞的增殖活性。结果:成功构建了稳定敲减FGF19的两株大肠癌细胞。稳定敲减FGF19的HCT116、COLO201细胞(KD组)的FGF19 mRNA水平与空载对照组(NC组)相比明显减少(P=0.001 1,P=0.000 1);与NC组相比，KD组细胞的FGF19蛋白表达明显下降，差异均具有统计学意义(P=0.001,P=0.000 1)。KD组细胞的迁移活性以及增殖能力均相比NC组明显下降(迁移P=0.001 7/P=0.000 1; CCK-8 P=0.042 5Bafilomycin A1说明书/P=0.033 4;克隆P=0.005 1/P=0.002 2)。结论:成功构建FGF19敲减慢病毒载体及大肠癌细胞株，敲减FGF19可使大肠癌细胞的迁移活性明显下降，增殖能力降低，为研究FGF19在大肠癌中的作用奠定了实验基础。