背景:黑枸杞花青素(Anthocyanins in Lycium ruthenicum Murr,ALRM)是黑枸杞中重要的活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节等功效。人脂肪源性血管外膜细胞(CD146~+hAD-PCs)是骨髓间充质干细胞的前体细胞,在体外具有促进造血干/祖细胞增殖与分化的功能。ALRM联合CD146~+hAD-PCs对脐血造血干/组细胞的体外支持作用有待于研究。目的:探讨ALRM联合CD146~+hAD-PCs对脐血CD34~+造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法:CCJNJ-42756493说明书K-8法检测不同质量浓度ALRM(0,200,400,600,800,1 000 mg/L)对CD146~+hAD-PCs增殖的影响;流式细胞术检测ALRM对CD146~+hAD-PCs细胞周期的影响。共培养实验分为空白组、ALRM组、CD146~+hAD-PCs组、ALRM+CD146~+hAD-PCs组,分析ALRM联合CD146~+hAD-PCs对脐血CD34~+造血干/祖细胞的体外支持作用。共培养1,2,4周,比较扩增后细胞数量、集落形成单位数量,流式细胞仪检测细胞免疫表型,ELISA检测细胞因子水平。结果与结论:(1)ALRM质量浓度为200 mg/L时,CD146~+hAD-PCs活力最高,CD146~+h AD-PCs的G_0/G_1期细胞比例下降,S期、G_2/M期细胞比例上升(P<0.01)。(2)脐血CD34~+造血干/祖细胞数量变化:在共培养1,2,4周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组高于ALRM组(P均<0.05),在共培养2,4周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组高于CD146~+hAD-PCs组(P均<0.05),ALRM组与空白组随着共培养时间延长细胞数量逐渐减少。(3)集落形成能力及免疫表型分析:在共培养1,2周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组的集落形成单位数量高于CD146~+hAD-PCs组和ALRM组(P均<0.05);在共培养1,2,4周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组CD45~+、CD34~+CD33~-细胞比例高于CD146~+hAD-PCs组(P均<0.01)。(4)细胞因子变化:在共培养4周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组的白细胞介素2水平高于ALRM组、CD146~+hAD-PCs组(P<RA-mediated pathway0.05);在共培养2,4周时ALRM+CD146~+hAD-PCs组白细胞介素3水平高于CD146~+hAD-PCs组(P<0.05);在共培养1周时ALRM+CD146~+h AD-PCs组的粒细胞集落刺激因子水平高于CD146~+hAD-PCs组,在共培养2周时高于ALRM组、CD146~+hAD-PCs组(P<0.01);在共培养1,2,4周时ALRM组、ALRM+CD14LY294002采购6~+hAD-PCs组的干扰素γ水平低于CD146~+hAD-PCs组(P<0.05)。(5)由于空白组无基质细胞,脐血CD34~+造血干/祖细胞在共培养1周之后就无法计数,未进行免疫表型、集落分析和细胞因子检测。(6)结果表明:ALRM可以通过促进CD146~+hAD-PCs增殖和细胞周期转化进而促进脐血CD34~+造血干/祖细胞的体外扩增,在造血干细胞移植研究方面具有重要价值。