目的:通过观察醒脑开窍针法、补阳还五汤、醒脑开窍针法并用补阳还五汤对MCAO大鼠脑梗塞平均面积百分比、血脑屏障(BBB)通透性、脑组织含水量、水通道蛋白4(AQP4)和水通道蛋白1(AQP1)的变化,探讨针药并用治疗脑梗塞的可能机制。方法:SPF级SD大鼠220只,220-250g,雌雄各半,采用完全随机法分为sham组(A组)、模型组(B组)、针刺组(C组)、中药组(D组)、针药并用组(E组),每组44只。B组、C组、D组、E组参照大脑中动脉栓塞模型(MCAO模型)复制永久www.selleck.cn/products/Docetaxel(Taxotere)型脑梗塞模型,造模成功率93.2%,死亡雄鼠2只,雌鼠13只,死亡率6.8%。造模成功后对大鼠神经缺损症状行行为学评分,选取造模成功大鼠。A组只行钝性血管分离,不予栓线操作。造模后第1天即开始针刺、中药治疗,sham组、针药并用组予针刺+中药灌胃,针刺组予以针刺,中药组予以中药灌胃,模型组不予任何处理。操作:针刺法予以醒脑开窍针法,针刺后留针20min,每日2次;中药予以补阳还五汤,按0.6ml/100g灌胃给药,每日1次,按针刺组固定法抓取绑定、不针刺。以上5组按3d、5d两个时间点取材,TTC染色法测定平均脑梗塞面积、每个时间点取4只,余下大鼠分别予伊文思蓝法(EB法)测定血脑屏障(BBB)通透性、干湿重法测定脑组织含水量、Western Blot法测定AQP4、AQP1表达,每个时间点取6只。结果:1、平均脑梗塞面积比:整体数据针刺组、中药组、针药并用组平均脑梗塞面积比小于模型组,针药并用组小于单纯针刺组和中药组,其中术后3d组间差异无统计学意义(P>0.05),术后5d针药并用组与针刺组差异存在统计学差异(P<0.05)。2、BBB通透性:(1)术后3d,与模型组相比,针刺组、中药组、针药并用组脑组织EB含量逐渐减少,针药并用组最少。(2)术后5d,与模型组相比,经针刺、中药、针药并用治疗后,脑组织EB含量明显减少(P<0.01)。(3)术后3d至5d,与模型组相比,脑组织EB含量普遍呈现下降趋势。3、脑组织含水量:(1)术后3d,与模型组相比,针刺组、中药组脑组织水肿程度无差异(P>0.05),仅针药并用组脑组织含水量下降差异具有显著统计学意义(P<0.01),仅针药并用组与shatrypanosomatid infectionm组脑组织含水量无差异(P>0.05)。(2)术后5d,模型组与治疗组组间差异不明显(P>0.05)。(3)术后3d至5d,脑组织含水量普遍呈现下降趋势,针药Dibutyryl-cAMP价格并用组数值最小。4、AQP4、AQP1表达:(1)AQP4表达:术后3d,与sham组相比,模型组AQP4表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组、中药组、针药并用组AQP4表达显著下降(P<0.01);与针刺组相比,中药组AQP4表达下降(P<0.05),针药并用组显著下降(P<0.01)。术后5d,与模型组相比,针刺组AQP4表达下降(P<0.05),中药组、针药并用组显著下降(P<0.01)。术后3d和5d,针刺组、中药组、针药并用组AQP4表达呈依次下降趋势,于术后3d针药并用组最低。(2)AQP1表达:术后3d,与sham组相比,针刺组下降具有统计学意义(P<0.05),针药并用组下降具有显著统计学意义(P<0.01);与模型组相比,针刺组AQP1下降具有统计学意义(P<0.05),针药并用组下降差异具有显著统计学意义(P<0.01);与中药组相比,针药并用组下降具有统计学意义(P<0.05)。术后5d AQP1表达各组差异均无统计学意义。术后3d至术后5d,AQP1表达普遍呈现下降趋势,于术后3d下降最明显,其中针药并用组表达最低。结论:1、针刺并用补阳还五汤可通过抑制AQP4、AQP1表达,降低BBB通透性、改善缺血性脑组织水肿以缩小脑梗塞面积,其疗效较单纯针刺和补阳还五汤更理想。2、结合脑梗塞后BBB破坏和缺血性脑水肿的不同阶段的病理机制,针刺、补阳还五汤、针药并用的干预应在脑梗塞的早期尽快实施,脑梗塞后3d可能为治疗的关键时间点,AQP4为关键靶点。