4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的:本课题组前期研究发现,RepSox分子式喹唑啉酮类化合物methylation biomarker12d具有较好的抗增殖活性。为了明确其关键药效团及取代基性质对化合物12d的靶点抑制活性与抗增殖活性的影响,本课题拟对其喹唑啉酮及咪唑并吡啶片段进行骨架跃迁及引入不同取代基,设计合成了三类4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮化合物,并对其体外抗增殖活性进行初步评价。选取活性最佳的化合物10b并开展靶点抑制活性研究,探讨上述结构改造对先导化合物抗肿瘤活性的影响。方法:1.通过对目标化合物的逆合成分析,设计合成路线:通过合环合成得到母核结构4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮,再与苯并咪唑等相关基团进行偶联得到不同系列的中间产物,对其进行结构修饰得到衍生物。2.所有目标化合物的分子结构借助HR-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR等波谱数据进行表征及确认。3.采用MTT法,测试化合物对不同肺癌细胞的体外抗增殖活性,计算出IC_Laduviglusib(50)值。4.用流式细胞术和免疫印迹法,验证目标化合物对肺癌细胞的周期和凋亡的影响。结果:以4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮为化合物的母核结构,共得到20个衍生物,并对其进行了体外抗肿瘤活性研究,筛选出1个活性化合物10b,其抗肿瘤活性相比于12d有了一定的提升。结论:通过合成得到的4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮类衍生物均为新化合物。其中化合物10b对人非小细胞肺腺癌细胞(H1975)表现出最佳的肿瘤抑制作用,其IC_(50)值为0.572μM,并诱导细胞凋亡,且对ROR1及其下游SRC、Akt和m TOR具有抑制作用,提示10b可以通过抑制ROR1/SRC/Akt信号通路而发挥抗肿瘤活性。