马奶富含外泌体具有免疫调节作用,但其作用机制尚未明确。诸多研究表明,乳源性外泌体在免疫调节、炎症预防中发挥重要作用,特别是参与T淋巴细胞及其亚群的平衡。T淋巴细胞是免疫系统的重要组成部分,通过参与细Adavosertib胞免疫来调节机体的免疫应答。T淋巴细胞调控机制复杂,其内部多种亚群相互制衡,共同维持免疫系统的稳定。本研究旨在探究马奶源外泌体(Mare’s Milk derived Exosomes,MMExos)对T淋巴细胞及其功能亚群的调控作用。MMExos分离及其生物学特征:使用超速离心等四种不同方法分离MMExos后,通过透射电子显微镜法、纳米颗粒跟踪分析及免疫印迹法对其形态、粒径、标志蛋白进行表征;采用蛋白组学和基因芯片技术分析MMExos蛋白质和mi RNA的表达特征。结果表明超速离心法分离出较高纯度的multi-gene phylogeneticMMExos,其粒径约156 nm,具有典型外泌体结构;MMExos中富含RHOA和mi R-155、mi R-30等免疫相关蛋白质和mi RNA。MMExos对T淋巴细胞及其功能亚群的调控:以小鼠脾脏淋巴细胞作为实验材料,与MMExos共培养;通过流式细胞术、ELISA、RT-q PCR及转录组学等方法研究MMExos对T淋巴细胞及其亚群的增殖、凋亡、分化以及分化后基因表达的影响。结果表明MMExos减弱T淋巴细胞的增殖能力,增加细胞凋亡。MMExos抑制初始CD4 T淋巴细胞向Th17细胞分化,促进其向Treg细胞分化。在MMExos的作用下,Th17细胞和Treg细胞分别有310、1Belumosudil84个基因的表达水平发生显著变化。两者的差异表达基因均富集于细胞因子受体相互作用、信号转导调节等生物学功能中。上述结果表明,MMExos具有调节T淋巴细胞及其亚群的功能。本研究从细胞免疫角度揭示了MMExos的免疫调节作用,为MMExos应用于免疫相关疾病提供依据。