风湿性心脏病大鼠血清对内皮细胞间充质转化的影响

目的:探讨风湿性心脏病(RHD)大鼠的血清对内皮细胞发生内皮间充质转化(EndMT)的影响。方法:先使用重组人转化生长因子-β1(TGF-β1)干预人原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)以观察其发生EndMT的情况,分为空白组和TGF-β1组;再使更多用大鼠血清和TGF-βⅠ型受体(TGF-β RⅠ)抑制剂SB431542干预HUVECs,分为control组Y-27632临床试验、RHD组和RHD+SB431542组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(western blotting)实验检测内皮细胞标志分子血管内皮细胞钙粘连蛋白(VE-cadherin)和间质细胞标志分子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平以观察细胞发生EndMT的情况。结果:与control组比较,RHD组的细胞增殖、迁移能力显著升高(P<0.05),且VE-cadherin蛋白的表达量降低,而α-SMA蛋白的表达量升高(P<0.05),表明发生了EndMT;而与RHD组比较,RHD+SB431542组的细胞增殖、迁移能力显著降低(P<0.05),且VE-cadherin蛋白的表达量升高,而α-SMA蛋白的表达量降低(P<0.05),表明EndMT被显著抑制。结论:RHD大鼠的血清高表达TGF-β1,可以Anti-inflammatory medicines诱导HUVECs发生EndMT,且能被SB431542抑制,表明在RHD大鼠血清促进内皮细胞间充质转化过程中,TGF-β1发挥着重要作用。