雪层杜鹃化学成分及其抗衰老活性研究

随着经济社会的不断发展,人口老龄化已成为突出问题。机体年龄的增加使得高血压、阿尔茨海默症、骨质疏松等疾病的患病率随之升高,这对社会的发展造成了很大的压力。雪层杜鹃是杜鹃属中的一种常绿灌木,主要分布在西藏3200 m以上的高山地带。雪层杜鹃的花和叶在藏药中分别作为不同的药材使用,花称为“达里”,具有治疗由“培根”引起的肺病的作用,而叶称为“巴鲁”则具有助消化和延缓衰老的作用。目前雪层杜鹃中化学成分研究主要集中在挥发油和多糖,其他化合物的研究相对较少,另外现代药理学研究发现雪层杜鹃提取物具有除螨和延缓衰老的作用。本文综合利用多种色谱技术从雪层杜鹃枝叶的乙酸乙酯部位中分离得到49个单体化合物,采用高分辨质谱(HRMS)、核磁共振波NBVbe medium谱(NMR)、红外(IR)等多种波谱手段,结合实测和计算ECD以及与相关文献比对确定化合物结构,分别为:nivalenoid A(1),nivalenoid B(2),1β,6α-dihydroxy-7-epi-eudesMirdametinib细胞培养m-3-ene(3),teucladiol(4),4β,6β-dihydroxy-1α,5β(H)-guai-9-ene(5),isocalammendiol(6),(+)/(-)-nivalnoid C(7a/7b),(+)/(-)-nivalnoid D(8a/8b),nivalnoid E(9),(+)/(-)-nivalone A(10a/10b),(+)/(-)-nivalone B(11a/11b),nivalone C(12),nivalone D(13),nivalone E(14),nivalone F(15),cannabiorcicyclolic acid(16),rubiginosin E(17),daurichromenic acid(18),anthopogochromene B(19),(+)/(-)-anthoponoid G(20a/20b),(2R,3S)-2-((E)-4,8-dimethylnona-3,7-dien-1-yl)-2,7-dimethylchromane-3,5-diol(21),confluentin(22),2,7-dimethyl-2-(4-methylpent-3-enyl)-3,4-dihydrochromen-5-ol(23),grifolin(24),cannabigerorcin(25),grifolic acid(26),(E)-3-(3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl)-2,4-dihydroxy-6-methylbenzoic acid(27),methyl(E)-3-(3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl)-2,4-dihydroxy-6-methylbenzoate(28),camarolide(29),8,5′-dimethoxyquercetin 3-O-α-arabinofuranoside(30),morin-3-O-α-L-lyxosid(31),(2R,3R)-taxifolin 3-O-arabinoside(32),epicatechin(33),(-)-epigallocatechin(34),(-)-catechin(35),dihydromyricetin(36),dihydroquercetin(37),2,4-dihydroxy-3,6-dimethyl methylbenzoate(38),litseachromolaevane A(39),methyl 2,4,6-trihydroxybenzoate(40),3-methoxy-4,5-dihydroxybenzoic acid(41),2-O-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxyphenylacetic acid(42),atranol(43),di-isobutyl phthalate(44)。化合物类型包括:6个倍半萜类化合物(1-6),其中化合物1和2是新化合物;27个混源萜类化合物(7a/7b-28),其中化合物7a/7b-15为新化合物;1个三萜类(29);8个黄酮类化合物(30-37),其中化合物30是新化合物;4个酚类化合物(38-41)和3个其他类化合物(42-44)。通过体外抗炎模型和氧化损伤保护模型评价了单体化合物的抗衰老活性。结果显示有7个化合物具有一定的抗炎活性,其IC_(50)范围为21.1-53.5μM;16个化合物在浓度为50μM时具备氧化损伤保护活性,其中化合物3、6、31、33、37使细胞存活率由H_2O_2损伤后的44.0%±2.3%提升至71.9%±1.1%以上,显著提高了SH-SY5Y细胞的存活率,表明雪层杜鹃中的单体化合物可以从抗炎和氧化损伤保护两方面发挥延缓衰老作用。综上,本论文从雪层杜鹃中鉴定了49个化合物,包括16个新化合物,并通过体外抗炎模型和氧化损伤保护Dorsomorphin供应商模型评价了单体化合物的抗衰老活性,该研究结果充实了雪层杜鹃的化学成分库,部分阐明了雪层杜鹃枝叶抗衰老的物质基础,为其进一步开发利用提供了科学依据。