目的 建立退热方中多组分的同时测定方法，并用网络药理学方法和体外实验进行验证，揭示退热方潜在的作用机制。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法，建立同时测定退热方中木犀草苷、牛蒡子苷、哈巴俄苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ和苦杏仁苷6种苷类成分的定量分析方法。基于Pubchem、SwissTargetPrediction、Drugbank、GeneCards、KEGG、Cytoscape等数据库或平台，采用网络药理学技术收集退热方苷类成分-靶点-疾病-信号通路信息，并绘制作用机制网络图。采用脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞构建体外炎症模型，通过MTT法测定细胞增殖能力，ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达，Griemolecular pathobiologyss法检测细胞一氧化氮（NO）水平。结果 6种苷类成分在各自范围内线性关系良好（r≥0.999），平均加样回收率（n=9）为96.67%～98.36%,RSD为0.56%～1.24%。该方法的精密度、稳定Liraglutide生产商性、重复性均符合定量分析要求。网络药理学研究表明6种苷类成分可通过MAPK、PI3K-Akt、NF-κB、IL-17RAD001试剂等与炎症-免疫调节密切相关的信号通路发挥抗流感、抗炎作用。体外细胞实验表明6种苷类成分均能抑制炎症因子TNF-α和NO的分泌，与网络药理学预测的主要通路相契合。结论 建立的6种苷类成分同时定量的HPLC分析方法准确、稳定可行，可用于退热方汤剂质量控制，网络药理学研究初步揭示了退热方的潜在作用机制，为退热方的质量控制和临床应用提供了参考。