表达狂犬病病毒G蛋白嵌合型重组水疱性口炎病毒的构建及鉴定

目的 以水疱性口炎病毒（vesicular stomatitis virus,VSV）为载体，构建表达狂犬病病毒（rabies virus,RV）G蛋白的嵌合型重组VSV。方法 将VSV骨架质粒G基因替换为狂犬病疫苗CTN-1株G基因，与分别表达T7聚合酶及VSV N、P、L蛋白的辅助质粒共转染293T细胞，获得重组病毒。通过RT-PCR、免疫荧光法和Western blot检测LiraglutideRV G基因和G蛋白表达。将重组病毒在Vero细胞上传代培养，检测不同代次病毒滴度并绘制病毒生长曲线。结果 成功获得了重组病毒VSV-RVG,RT-PCR结果hepatolenticular degeneration表明重组病毒基因组中成功插入了RV G基因，免疫荧光法和Western blot可检测到RV G蛋白的表达。重组病毒连续传代5次，病毒滴度稳定在7.5～8.5 lgTCID50/mL之间。结论 成功构建了表达RV G蛋白的嵌合型重组VSV，重组病毒具有良好的遗传稳定性，为以VSV为载体的反SCH727965采购向遗传学技术平台的构建奠定了基础。