脂肪间充质干细胞来源外泌体通过mTOR通路调节变应性鼻炎患者外周血Th2/Treg平衡

目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell exosomes, ADSC-exos)调节变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)患者外周血Th2/Treg平衡的机制。方法:选取2022年3月-2022年10月于郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科就诊的AR患者30例,再选择30例同期就诊的单纯鼻中隔偏曲患者作为对照组。期间收集所有患者的外周静脉血10 mL,采用ELISA检测法分析血浆中IL-4、TGF-β细胞因子水平,密度梯度离心法提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)后进一步提取蛋白及RNA,行qRT-PCR检测IL-4、TGF-β、GATA3、Foxp3基因的表达水平,Western Blotting检测AR患者与对照者PBMCs中p-PI3K(P85)、p-AKT(Ser473)、p-mTOR(Ser2448)、p-p70S6K(Thr389)的蛋白表达水平,流式细胞术分析Th2和Treg细胞的比例。刺激分化AR患者的PBMCs,并与ADSC-exos共培养。Western Blotting检测外泌体处理组与未处理组p-PI3K(P85Protein Purification)、p-AKT(Ser473)、p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)蛋白的表达水LEE011供应商平,流式细胞术分析Th2和Treg细胞的比例,ELISA检测细胞培养上清中IL-4、TGF-β的水平。结果:AR组患者外周血中mTOR通路较对照组显著激活,血浆中IL-4水平较对照组升高,TGF-β水平较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。AR组患者外周血Th2细胞比例较对照组升高,Treg细胞比例下降,差异有统计学意义(P<0.01)。外泌体处理组与未处理组比较,mTOR通路蛋白表达水平下降,IL-4水平下降,TGF-β水平升高;Th2细胞比例下降,Treg细胞比例升高(P<0.01)。结论:AR患者外周血单个核细胞中存在Th2、TreTaurineg细胞的失衡,其外周血单个核细胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路被激活,ADSC-exos可能通过PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路调节AR患者Th2/Treg的平衡。