目的:尿酸盐结晶(Monosodium urate crystals,MSU)沉积在局部组织、器官诱导炎症反应,引起痛风等相关疾病,已成为临床常见和多发病种。MSU引起的炎症应答与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体激活密切相关。既往研究显示,MSU通过诱导NLRP3炎症小体激活,促进IL-1β成熟、分泌,引起炎症效应。因此,阻断NLRP3炎症小体激活可能成为治疗MSU相关疾病的新策略。脂氧素A4(Lipoxin A4,LXA4)是人体内重要的内源性抗炎介质,能够对多种炎症细胞和炎症相关因子起到负性调节作用,缓解炎性病理Alpelisib IC50损伤,被誉为炎症反应的“刹车信号”。然而,LXA4能否抑制MSU诱导的NLRP3炎症小体激活,目前尚未见报道。为此,本研究通过体内和体外实验验证LXA4干预MSU诱导的炎症反应,旨在探讨LXA4对MSU诱导的NLRP3炎症小体激活的抑制作用,并基genetic etiology于氧化应激反应、Nrf2信号通路研究其具体分子调控机制,期望GW4869核磁为LXA4治疗MSU相关疾病提供理论依据。方法:1.构建MSU诱导NLRP3炎症小体激活的细胞模型体外培养THP-1、BMDM细胞,LPS作为第一信号预先诱导,然后MSU刺激细胞以激活NLRP3炎症小体,ELISA、Western blot测定炎症因子变化;2.探讨LXA4对NLRP3炎症小体激活的干预作用LXA4预先干预MSU诱导的NLRP3炎症小体激活模型,通过ELISA、Western blot、LDH释放率、细胞凋亡染色探讨LXA4对NLRP3炎症小体的干预效果;通过免疫荧光、免疫共沉淀分析LXA4对NLRP3炎症小体组装的影响;3.探讨LXA4对氧化应激干预作用通过特异性荧光探针检测总ROS及线粒体ROS、膜电位、钙离子水平,光泽精增强的化学发光法测定NADPH氧化酶活性;4.探讨LXA4是否通过干预Nrf2来抑制NLRP3炎症小体激活通过Western blot、免疫荧光检测Nrf2激活情况;利用Nrf2特异性激活剂激活Nrf2,检测LXA4对NLRP3炎症小体激活的抑制作用是否受到影响;采用分子对接、DARTS实验分析LXA4调控Nrf2的作用靶点;5.探讨LXA4对Nrf2/Klf9/TXNRD2的调控机制利用Western blot、PC…