研究背景随着对肿瘤微环境的研究越来越深入,仅仅通过杀伤肿瘤细胞并不是治疗肿瘤的最优解这样的观念越来越受到重视,肿瘤微环境的相关治疗靶点是增强肿瘤治疗效果的重要途径。肿瘤相关成纤维细胞是乳腺癌中最丰富的基质细胞,可以调控肿瘤细胞多种恶性生物学行为,并且参与化疗抵抗和肿瘤进展、复发。但很少有研究探讨肿瘤相关成纤维细胞在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用。我们推测肿瘤相关成纤维细胞在乳腺癌放疗抵抗中具有重要作用,促进乳腺癌细胞增殖和放疗抵抗。目的本研究旨在探讨肿瘤相关成纤维细胞诱导乳腺癌细胞增殖和放疗抵抗的作用和机制。方法我Cardiac biomarkers们通过接受乳房切除术更多的乳腺癌患者的新鲜肿瘤组织中分离出原代成纤维细胞,通过Western blot和细胞免疫荧光两种实验方法来检测所分离的细胞中肿瘤相关成纤维细胞的分子标记物以确定所分离出的细胞表型。并通过克隆形成实验、移植瘤小鼠模型等体内外实验研究肿瘤相关成纤维细胞对乳腺癌细胞增殖能力和放疗抵抗的影响。然后进行细胞因子抗体芯片分析筛选乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞调控乳腺癌细胞放疗抵抗所分泌的细胞因子,通过乳腺癌标本的免疫组化等方法验证芯片结果。通过克隆形成实验等方法检测IL-6对乳腺癌细胞增殖能力和放疗敏感性的影响。用IL-6中和抗体或STAT抑制剂进行挽救实验。通过Western blot实验检测各组STAT3的磷酸化水平,并进行克隆形成实验等验证IL-6在肿瘤相关成纤维细胞促进乳腺癌细胞增殖能力和放疗抵抗中的作用。将肿瘤相关成纤维细胞和人乳腺癌细胞株MD-MB-231混合并接种到裸鼠皮下建立小鼠移植瘤模型。然后给药组通过腹膜注射的方式给予托珠单抗治疗。最后,我们对103例术后进行放疗的乳腺癌患者的肿瘤标本进行免疫组化检测IL-6和STAT3磷酸化水平,并通过随访数据进行统计分析。结果我们成功从接受乳房切除术的乳腺癌患者的新鲜肿瘤组织中分离出原代成纤维细胞。体内外实验结果显示,原代NN2211分子式肿瘤相关成纤维细胞的条件培养基可以促进乳腺癌细胞增殖和放疗抵抗。芯片和免疫组化结果显示,乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞高度分泌IL-6。挽救实验结果表明原代肿瘤相关成纤维细胞通过IL-6促进乳腺癌细胞增殖和放疗抵抗。与对照组相比,托珠单抗联合放射治疗可以显著抑制小鼠的肿瘤生长。IL-6上调和STAT3磷酸化水平与乳腺癌患者无病生存期呈负相关相关。结论乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞通过产生IL-6来激活肿瘤细胞内STAT3信号通路,从而诱导乳腺癌细胞增殖和对放疗的抵抗作用,IL-6/STAT3信号通路是乳腺癌治疗的重要治疗靶点。