目的 了解杭州市中医院临床各科室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的检出情况及耐药特点。方法 收集2016年—2022年分离自临床样本的非重复CRKP,分析这类菌株的分布特征和耐药性试验结果，采用3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制实验检测碳青霉烯酶型，并通过胶体金免疫层析法检测其无法确定酶型的菌株。结果 共检测146株CRKP,其中检出最多的是呼吸道标本，检出最多的seed infection科室为重症医学科。药敏结果显示，CRKP对β-内酰胺类、碳青霉烯类、氨曲南的耐药率均>95%,对更多头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为2.74%。碳青霉烯酶初筛实验显示产A类丝氨酸酶的菌株共133株，产金属酶2株，不确定菌株11株，酶抑制剂增强试验对酶型的检出率为92.47%。结论 本医疗机构CRKP形势严峻，应及时监测。本研究CRKP主要耐药机制为产碳青霉烯酶，并且以产A类丝氨酸酶为主，酶抑制剂增Tamoxifen IC50强试验可以检测出大部分酶型，临床实验室应合理优化碳青霉烯酶初筛实验，为临床精准用药提供直接依据。