阿霉素(Doxorubicin,DOX)为广谱抗瘤的化疗药物,对许多肿瘤都有作用,但是在宠物临床应用中对非靶器官有严重副作用,能引起多种脏器的毒性,尤其是肝脏。因此,开发天然产物以此来降低DOX所致的脏器毒性具有深远意义。紫檀芪(Pterostilbene,PTE),最初是从紫檀中分离提取获得的一种天然产物,故名紫檀芪,有研究证实PTE是一种天然的芪类多酚化合物,具有天然活性,近年来因其潜在的抗癌、抗氧化、抗炎及抗糖尿病等功效引起人们的重视。本研究旨在研究PTE对DOX诱导的小鼠肝损伤的保护作用,从调节肝功能指标、抗炎及调节氧化应激和抑制肝脏焦亡发展揭示其保护作用,为能够降低DOX诱导的肝脏毒性的药物的研究夯实一定的科学基础。本试验主要研究内容及结果如下:试验随机选取40只健康的6-8周龄的c57小鼠,将试验分为4组:(1)对照组(Control);(2)阿霉素组(DOX);(3)共处理组(PTE+DOX);(4)预处理组(PRE-PTE)。试验开始的1-21 d,PRE-PTE组每天灌胃含橄榄油的PTE(400 mg/kg),其余3组灌胃含DMSO的橄榄油。22 d开始,向Control组每天灌胃含DMSO的橄榄油,并且腹腔注射含DMSO的生理盐水,3次/周;向DOX组每天灌胃含DMSO的橄榄油,进行腹腔注射15 mg/kg含DOX的生理盐水,3次/周;向PRE-PTE组和DOX+PTE组每天灌胃含橄榄油的PTE(400 mg/kg),进行腹腔注射15 mg/kg含DOX的生理盐水。试验进行到第35 d,在灌胃最后一次之后,控制小鼠禁食不禁水,直到24 h之后处死小鼠,然后采集血液样本和肝脏组织。检测血清中肝脏病理指标碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的表达,以及肝点击此处脏组织病理切片来研究PTE对DOX诱导的小鼠肝损伤的保护作用。为阐明PTE对DOX诱导的小鼠肝损伤保护作用的机理,进一步检测了肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的表达,并通过q PCR法检测了IL-10、TNF-α、IL-18、IL-1β、NLRP3及IL-6 m RNA的相对表达量,进一步采用Western blot检测肝脏组织中GSDMD、GSLaboratory Management SoftwareDMD-N、Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3的表达。结果:(1)收样后,观察到DOX组肝脏组织颜色发白,眼观可看到明显病灶。PTE+DOXselleck Bucladesine组和PRE-PTE组肝脏组织颜色相对红润,且眼观病灶减少。(2)各组小鼠的肝脏质量进行比较:相比Control组,DOX组小鼠肝脏质量极显著减小(p<0.01)。相比DOX组PTE+DOX组和PRE-PTE组小鼠肝脏质量极显著增加(p<0.01)。(3)相比Control组,DOX组小鼠血清中ALT、AST和ALP的含量极显著升高(p<0.01);相比DOX组,PTE+DOX组和PRE-PTE组极显著降低小鼠血清中的ALT、AST和ALP的含量(p<0.01)。(4)HE染色病理切片显示,DOX组小鼠肝脏细胞大片肝细胞中度脂肪变性,细胞质内见大量脂肪空泡。伴有轻度肝炎,肝板间见炎症细胞浸润,汇管区血管扩张和充血,少量炎症细胞浸润,以淋巴细胞为主。同时伴随着肝血窦充血和扩张,肝组织水肿;PTE+DOX组和PRE-PTE组脂肪变性明显减轻,局部见少量炎性细胞。(5)相比Control组,DOX组的ROS含量极显著升高(p<0.01)。相比DOX组,PTE+DOX组和PRE-PTE组的ROS含量极显著降低(p<0.01)。(6)相比Control组,DOX组的MDA含量极显著增加(p<0.01),SOD和CAT含量显著降低(p<0.05)。与DOX组相比,PTE+DOX组的SOD的含量极显著增加(p<0.01),CAT的含量显著增加(p<0.05);PRE-PTE组的SOD和CAT的含量极显著增加(p<0.01),MDA含量极显著降低(p<0.01)。(7)相比Control组,DOX组极显著地增加了IL-10、TNF-α、IL-18、IL-16、NLRP3和IL-6的m RNA相对表达量(p<0.01)。相比DOX组,PTE+DOX组和PRE-PTE组极显著地降低了IL-10、TNF-α、IL-18、IL-1β、NLRP3和IL-6的m RNA相对表达量(p<0.01)。(8)相比Control组,DOX组极显著地增加了IL-18、IL-1β、NLRP3、caspase-1和GSDMD的m RNA相对表达量(p<0.01)。与DOX组相比,PTE+DOX组PRE-PTE组和极显著地降低了IL-18、IL-1β、NLRP3、caspase-1和GSDMD的m RNA相对表达量(p<0.01)。(9)相比Control组,DOX组的GSDMD、GSDMD-N、Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3蛋白表达量均极显著增加(p<0.01);与DOX组相比,PTE+DOX组的GSDMD和Caspase-1蛋白表达量显著降低(p<0.05),GSDMD-N、Cleaved Caspase-1和NLRP3蛋白表达量极显著降低(p<0.01);PRE-PTE组GSDMD蛋白表达量显著降低(p<0.05)GSDMD-N、Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3蛋白表达量极显著降低(p<0.01)。结论:PTE能显著改善DOX诱导的小鼠肝脏组织中肝细胞脂肪变性、炎症浸润和肝血窦充血等病理状态,调节小鼠血清中ALT、AST和ALP水平,且能够通过抗炎、调节氧化应激和焦亡通路对DOX诱导的肝损伤起到保护作用。