背景:转移性结直肠癌(Metastatic Colorectal Cancer,mCRC)几乎无法治愈,对于不能根治的mCRC指南推荐行姑息治疗,根据患者治疗的具体情况可分为一线治疗阶段、二线治疗阶段、三线及后线治疗阶段。然而部分mCRC患者由于身体状况差、年龄大、经济困难等原因无法耐受或拒绝标准化疗及靶向治疗,转而求助于传统中医或中西医结合治疗,仍获得了较好的临床疗效。中医药治疗肠癌历史悠久,具有简、便、廉、验的特点,是我国mCRC治疗中的重要组成部分,同时中西医结合是我国恶性肿瘤治疗的优势所在。已有大量研究表明中医中药治疗可为mCRC患者带来临床获益,具有独特的临床疗效。同时中医药治疗mCRC在长期的临床实践过程中积累了大量的临床经验,很多临床研究的结果表明中医中药具有延长mCRC患者生存时间、提高患者生活质量、减少标准治疗副反应、减轻患者临床症状等作用。祛邪胶囊是杨宇飞教授治疗mCRC的常用院内方药,祛邪胶囊由明代医家李中梓所著《医宗必读》中所载的“阴阳攻积丸”加以化裁而成,具有扶正祛邪、温阳通下的功效。祛邪胶囊在中国中医科学院西苑医院应用近30年,多项随机对照临床试验(中国临床试验中心注册号:ChiCTR-IOR-16009733、ChiCTR-IOR-16008924),发现祛邪胶囊能提高 mCRC患者生活质量、降低病死率、延长患者总生存期。然而祛邪胶囊在mCRC不同治疗阶段的临床疗效是怎样的,未见有深入的研究或亚组分析提供临床证据。同时祛邪胶囊药物组方复杂,成分众多,作用机制并不单一,且仍有很大一部分作用机制未被探明。因此进一步明确祛邪胶囊在mCRC不同治疗阶段的获益情况及优势人群特征,并探索祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制具有重要的临床意义。目的:分析祛邪胶囊在转移性结直肠癌不同治疗阶段的优势人群特征,探索祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制。为祛邪胶囊在转移性结直肠癌的临床应用提供可靠依据。方法:临床研究部分纳入2021年11月15日-2023年1月5日就诊于西苑医院肿瘤门诊的mCRC患者60例(一线、二线、三线及以上均不少于15例),口服祛邪胶囊一日2次,一次5粒,疗程:30天(服用20天休息10天)。根据当前西医治疗的最佳中位无进展生存期(mPFS)情况,将患者区分为祛邪胶囊优势人群和祛邪胶囊非优势人群。比较优势人群与非优势人群在基线资料、外周血ctDNA丰度、免疫细胞分布、肿瘤标志物等方面的差异,总结祛邪胶囊优势人群特征,为祛邪胶囊在mCRC的临床应用提供建议。体外研究部分分别选择肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞,每一类型肠癌细胞均分为CTRL组(空白对照)、阴性对照组(生理盐水肠吸收液)、Qu-Xie组(祛邪胶囊肠吸收液)、阳性对照组(5-Fu)。CTRL组不予任何干预、阴性对照组予生理盐水肠吸收液、Qu-Xie组予最佳作用浓度的祛邪胶囊肠吸收液、阳性对照组予20μg/mL的5-Fu,干预时间为祛邪胶囊肠吸收液筛药时的最佳作用时间。干预完成后Fulvestrant半抑制浓度分别检测三类肠癌细胞增殖迁移能力、遗传物质损伤情况、细胞周期及凋亡、细胞癌基因蛋白表达量。结果:1.祛邪胶囊能够延长mCRC患者无进展生存期,临床用药安全性较好。常见的不良反应为腹泻,均为I-II度(CTCAE v4.03分级)。有18名患者因为I-II度腹泻导致药物用量减少。2.祛邪胶囊优势人群可能具有以下基线特征:①直肠癌占比更低、结肠癌占比更高,②溃疡型腺癌占比更低,③低分化占比更低、中-高分化占比更高,④基因分型BRAF突变率更低,⑤肝脏转移比例更低、远处淋巴结转移比例更高,⑥肿瘤负荷更低,⑦中医辨证肝郁脾虚证、脾肾两虚证占比更高,⑧一线治疗阶段占比更高,⑨既往用过靶向药物占比更低、既往用过化疗药物占比更高。3.祛邪胶囊优势人群治疗后可能会出现以下反应:①外周血ctDNA突变丰度降低,②淋巴细胞、总T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、TNF-α升高,③γδ T细胞、CEA、CA199、ALP、γ-GT 降低。4.祛邪胶囊对肠癌SW480、MLN4924HT-29、Caco-2细胞增殖、迁移具有抑制作用,抑制效果上Caco-2细胞最佳,SW480、HT-29细胞次之。5.祛邪胶囊对肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞遗传物质具有损伤作用,损伤效果上HT-29细胞最明显,SW480、Caco-2细胞相对较轻。6.祛邪胶囊可诱导肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞发生周期阻滞及细胞凋亡,周期阻滞效果上HT-29、Caco-2细胞较明显,SW480细胞不明显;细胞凋亡凋亡率上HT-29细胞最高,SW480、Caco-2细胞次之。7.祛邪胶囊可调控肠癌 Sclassification of genetic variantsW480、HT-29、Caco-2 细胞 APC、TP53、MAPK、KRAS蛋白表达,HT-29细胞癌相关蛋白表达量改变最明显、SW480细胞次之、Caco-2细胞最差。结论:祛邪胶囊能延长mCRC患者无进展生存期,祛邪胶囊优势人群可能具有以下基线特征:结肠癌占比更高、中-高分化占比更高、BRAF突变率更低、肿瘤负荷更低、肝郁脾虚证、脾肾两虚证占比更高。祛邪胶囊优势人群治疗后可能会出现以下反应:①外周血ctDNA突变丰度降低,②淋巴细胞、总T细胞、CD8+T细胞、NK 细胞、TNF-α升高,③γδ T 细胞、CEA、CA199、ALP、γ-GT 降低。祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制之一是触发细胞遗传物质损伤,进而诱导肠癌细胞出现周期阻滞或细胞凋亡,从而抑制肠癌细胞的增殖迁移。但由于祛邪胶囊组方成分众多,作用机理复杂,其抗肿瘤作用并不单一,后续可继续对祛邪胶囊进行深入研究或者筛选出方中主要抗肿瘤成分进行抗肿瘤研究,以期阐明祛邪胶囊抗肿瘤的具体药效成分和全面的作用机制。