宠物肿瘤是兽医临床中最常见的疾病之一,影响宠物生活质量、严重威胁其生命健康。目SCH727965小鼠前,肿瘤性疾病已成为犬、猫等宠物死亡的主要原因。同人类肿瘤一样,临床通常采用手术、放射治疗或化疗等方法干预动物肿瘤,也可以采用手术结合化疗或放射治疗等方法联合治疗。而化疗作为肿瘤治疗的主要实施方法,同样面临着巨大挑战。随着天然提取物或化合物的功能不断被发掘,越来越多的研究表明它们对许多疾病有效。鉴于此,具有安全性及调理性等系列特点的天然化合物在临床上备受关注,天然化合物在未来宠物肿瘤防治中所发挥的作用正不断增大。甜橙黄酮是一种从柑橘类水果中提取的天然黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤特性。虽然已有研究表明黄酮类化合物与癌细胞凋亡、自噬和细胞周期阻滞的关系,但黄酮类化合物对化疗诱导作用的影响知之甚少。而在临床中,天然化合物已被应用于与化疗药物联合,以提高疗效或减少不良反应。甜橙黄酮是否在降低化疗诱导的细胞焦亡中发挥作用,值得探索。本研究首先通过建立小鼠急性肠损伤模型以评估甜橙黄酮及化疗药物顺铂药效。剖检结果显示,单独施用甜橙黄酮的小鼠肠组织未见明显异常,同时该组小鼠体重一直维持正常水平,表现出较高的生物安全性。顺铂组小鼠肠道出现显著的肠道出血、肠段变短、出血等病理组织学变化,上述变化在甜橙黄酮与顺铂联用组明显减弱。上述组织进行HE染色后的结果显示,甜橙黄酮可减少顺铂诱导的肠绒毛变短、数量减少及肠绒毛完整性丧失等变化。免疫组化结果显示,顺铂诱导的中性粒细胞浸润、杯状细胞减少等现象也在甜橙黄酮作用下得到部分逆转。最后建立小鼠黑色素瘤模型,剖检结果显示,甜橙黄酮与顺铂联合Cadmium phytoremediation用药组的平均肿瘤体积及重量明显小于其他三组,而甜橙黄酮单独施药组的平均肿瘤体积及重量也明显小于对照(PBS)组。以上结果证明了甜橙黄酮削弱由顺铂诱导的炎性肠损伤的同时,不影响顺铂在体内发挥抗肿瘤作用,甚至可协同顺铂增强抗肿瘤作用。为深入阐明上述作用的潜在机制,首先检测甜橙黄酮对化疗药物顺铂诱导的细胞毒性的影响以及焦亡相关分子标志物的变化。通过LDH乳酸脱氢酶释放实验及实时荧光定量PCR、小鼠体重、BCS评分等实验验证了甜橙黄酮的生物安全性及抗炎特性后,即可选定用于体内、外实验中甜橙黄酮的药物浓度更多。随后通过Western blotting方法检测顺铂诱导下细胞焦亡相关标志物的表达情况,结果显示,甜橙黄酮可削弱由顺铂诱导的细胞焦亡。施药后,细胞在显微镜下的形态变化也显示出相同的实验结果。同时,在与细胞焦亡相关的活性氧(ROS)与DNA损伤中,甜橙黄酮同样减弱了顺铂诱导的ROS激增及DNA损伤。以上问题的研究结果将有助于深入探索天然化合物在宠物肿瘤化疗过程中的作用。