肾缺血再灌注损伤(Ischemia-rInfluenza infectioneperfusion injury,IRI)多是由肾前性因素触发的肾脏内炎症级联反应,从而导致组织损伤。巨噬细胞在IRI诱发的炎症反应中起重要作用。炎症初期,M1型巨噬细胞占主导位置,释放促炎因子和趋化因子诱导炎症反应;炎症中后期,巨噬细胞向M2型转化,大量释放抑炎因子和多种生长因子抑制炎症,促进组织修复。脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cell,ADMSC)是一类多能性成体干细胞,具有修复组织损伤功能。研究发现ADMSC的促修复作用主要依靠产生及分泌生物活性因子,对损伤细胞的代谢进行干预,外泌体(Exosome,Exo)是其中最有治疗价值的因子之一。此外,有研究报道ADMSC-Exo可减轻大鼠和小鼠肾IRI引起的肾损伤。本实验拟探究ADMSC-Exo是否通过调节巨噬细胞极化来对犬肾IRI起到保护作用,为其应用于临床实验提供理论依据。手术建立犬单侧肾IRI模型,分为:空白组(空白手术)、模型组(肾IRI模型)和实验组(ADMSC-Exo干预),观察ADMSC-Exo对炎性细胞浸润、炎性因子含量和巨噬细胞表型的影响。体外实验运用ELISA和q PCR检测经LPS诱导的巨噬细胞在与ADMSC-Exo共培后的表型变化。对犬肾脏组织中mi RNA进行q PCR检测,筛选可能参与巨噬细胞极化调节的mi RNA,并对其进行体内外实验验证。体内实验结果表明,在肾脏发生IRI后立刻在肾皮质区域分点注射ADMSC-Exo,能够减少犬肾脏组织内的炎性细胞浸润,显著降低血清和肾脏组织中的促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量(p<0.05),并提高抑炎因子IL-10和TGF-β的含量(p<0.1),减轻炎症反应。同时,M1型巨噬细胞标志物i NOS表达量显著CB-839小鼠降低(p<0.05),M2型巨噬细胞标志物Arg-1表达量升高(p<0.05)。体外实验中,观察到ADMSCExo可以促进LPS诱导的巨噬细胞由M1型向M2型转化,并影响巨噬细胞释放的炎性因子表达量。在对犬肾脏组织内的mi RNA进行检测后发现,mi R-146a的变化与M2型巨噬细胞相关。通过mi RNA功能学实验证实,mi R-146a能够促进LPS诱导的巨噬细胞由M1型向M2型转化,当抑制ADMSC-Exo中的mi R-146a后,发现ADMSPD-0332991CExo促进巨噬细胞极化的作用被削弱。结论:ADMSC-Exo能够通过转运mi R-146a调节巨噬细胞极化,减少肾脏组织内炎性细胞的浸润,减轻炎症反应,减轻犬肾IRI。