目的:观察灵龟八法按时开穴灸对衰老模型大鼠睾丸细胞凋亡的影响,并探讨其延缓睾丸衰老的作用机制。方法:32只雄性SD大鼠随selleck抑制剂机分为空白组、模型组、灵龟八法组和维生素E组,每组8只。除空白组外,其余3组均进行D-半乳糖溶液腹腔注射复制亚急性衰老模型,共42天。造模成功后,两治疗组开始予以灵龟八法按时开穴灸和维生素E进行治疗,治疗28天。采用酶联免疫(ELISA)法分别检测大鼠血清中SOD、MDA的含量;苏木精伊红染色(HE)法检测睾丸组织一般形态结构的变化,以及观察睾丸间质细胞数量;采用原位末端标记(TUNEL)染色法观察睾丸细胞的凋亡情况,并计算睾丸生精细胞的凋亡率;蛋白印迹(WB)法检测大鼠睾丸组织中BCL-2、BAX的表FG-4592达水平。结果:(1)与空白组比较,模型组大鼠组血清中SOD含量显著减少(P<0.01)且MDA含量增多(P<0.01);睾丸组织中BCL-2表达下降(P<0.01)且BAX表达显著升高(P<0.01);睾丸阳性核表达数量显著增多;睾丸生精细胞凋亡率显著上升(P<0.01);睾丸间质细胞数量明显减少(P<0.01)且睾丸组织结构损伤较严重。(2)与模型组比较,两治疗组血清中SOD含量均显著增多(P<0.01)且MDA含量显著减少(P<0.01);睾丸组织中BCL-2表达均上升(P<0.01)且BAX表达下降(P<0.01);睾丸阳性核表达数量均显著减少;睾丸生精细胞凋亡率均显著下降(P<0.01);睾丸间质细胞数量均明显增多(P<0.01)且睾丸组织结构损伤较轻。(3)两治疗组比较,血清中SOD、MDA含量的差异不具有统计学意义(P>0.05);灵龟八法按时开穴灸组睾丸组织中BCL-2的表达上升明显、BAX表达下降,以及细胞凋亡率更低,差异具有统计学意义(P<0.05);灵龟八法组睾丸阳性核表达数量更少,且睾丸组织结构比较完整;两治疗组睾丸间质细胞数量差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:(1)灵龟八法按时开穴灸和维生素E均能够增强睾丸细胞的抗氧化能力。(2)灵龟八法按时开穴灸和维生素E治疗均能够抑制睾丸细胞的凋亡。(3)灵龟八法按时开穴灸和维生素E均可改善睾丸组织的内环境,恢复睾丸组织受损的细胞形态结构。(4)灵龟八法按时开穴灸对睾丸细胞凋亡的抑制作用要优于维生素E。(5)结果表明两治疗方法均可通过调控SOD、BCL-2、BAX的表达来抑制细胞凋亡,其机制可能是通过平衡自由基,增强机体抗氧化能力,减少氧化损伤,进而dental infection control抑制睾丸细胞凋亡达到延缓生殖细胞衰老的目的。