植物中由RNA介导的DNA甲基化过程(RdDM)是一种重要的抵抗双生病毒的转录水平沉默(TGS)机制。但双生病毒编码的蛋白是否能并如何直接抑制RdDM通路仍然不太清楚。我们发现木耳坦型棉花曲叶病毒PF-07321332半抑制浓度(CLCuMuV) V2蛋白能够抑制RdDM过程,其能够和烟草Argonaute4 (AG04)互作,而突变体V2~(L76S)在丧失与AGO4互作的同时也会丧失抑制TGS的能力。当我们将CLCuMuV的V2替换成V2~(L76S)后发现突变体病毒的侵染力减弱,病毒DNA的甲基化水平明显升高。这些结果说明了CLCuMuV的V2蛋白能够通过和本生烟草AGO4的互作来抑制植物RdDM介导的TGS过程从而促进病毒的繁殖。我们还发现了一种V2抑制转录后水平基因沉默(PTGS)的新机制。我们发现当病毒依靠伤口或昆虫噬咬入侵植物时,植物会迅速激起钙流,螯合了钙离子的AZD1152-HQPA半抑制浓度钙调蛋白(CaM)会与钙调蛋白结Pediatric spinal infection合转录因子(CAMTA3)互作并激活CAMTA3。被激活的CAMTA3能够直接结合到RDR6和BN2的启动子区域,促进基因的转录,并且BN2作为一个核酸酶能够通过降解小RNA (miRNA)来上调AGO1、AGO2和DCL1的信使RNA (mRNA)水平。因此,RNAi通路中部分重要基因(RDR6、AGO1、AGO2和DCL1)的表达会增强,而V2能够通过和CaM的互作抑制CaM与CAMTA3之间的结合从而负调控PTGS通路。这些结果阐述了一条新的植物免疫通路,同时也为研究抗病毒策略提供了新的思路。