目的1.临床研究:通过前瞻性、随机对照研究,评价感咳颗粒治疗轻型/普通型新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID-19)的临床疗效及安全性,为临床治疗该病提供有效方药和依据。2.实验研究:探讨感咳颗粒能否通过抑制NOX2/ROS/NF-κB通路减轻炎症和氧化应激,从而改善脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)。方法1.临床研究:以2022年04月01日至2022年12月31日于成都市公共卫生临床医疗中心住院的轻型及普通型COVID-19患者为研究对象,按随机数字表法分为观察组112例(给予感咳颗粒10g/次,3次/日,联合西医常规治疗)和对照组112例(仅给予西医常规治疗),两组均治疗7天。比较两组患者治疗前人口学资料、基础疾病、临床症状、实验室检查等基线数据,住院期间主要临床症状(第3、5、7天发热、咳嗽、咳痰、咽痛、头痛、乏力症状消失率)改善情况、核酸转阴时间、平均住院时间、重症/危重症转化率及不良事件发生率。2.实验研究:将48只雄性ICR小鼠按体重分层随机分为对照组、模型组、地塞米松组(5mg/kg)及感咳颗粒低、中、高剂量组(4.7g/kg、9.4g/kg、18.8g/kg),灌胃给药,每日1次,连续两周。末次给药后3h,采用气管滴注LPS建立ALI小鼠模型。24h后处死小鼠,收集小鼠血液、肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织。记录小鼠生存情况及体重变化情况;检测肺组织湿/干重比(Wet/Dry,W/D)、BALF中细胞涂片计数各分类细胞比例;BCA法测定BALF总蛋白浓度;HE染色法观察肺组织病理变化并进行病理学评分;ELISA法检测血清和BALF中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平;检测肺组织ROS、MDA含量及MPO、SOD、GSH-Px活性;WB法检测肺组织中NOX2、p47phox、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达;IHC染色法检测肺组织中NF-κB蛋白表达及入核情况;RT-qPCR法检测肺组织Nox2、Nf-κb mRNA表达。结果1.临床研究:(1)观察组脱落3例,最终参与统计的患者共221例,其中观察组109例,对照组112例;(2)两组患者治疗前人口学资料、基础疾病、临床症状、实验室检查等基线数据比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)观察组治疗第3、5、7天咳嗽、咽痛、头痛、乏力症状消失率均高于对照组,差异有统计学意MS-275义(P<0.05);治疗第3、5、7天,两组患者发热、咳痰症状消失率差异无统计学意义(P>0.05);(4)观察组和对照组核酸转阴时间分别为(13.86±3.675)d、(14.16±3.141)d,差异无统计学意义(P>0.05);观察组和对照组住院时间分别为(10.06±3.536)d、(11.57±2.995)d,差异有统计学意义(P<0.05);观察组和对照组住院期间均未转为重型或危重型;(5)两组患者治疗期间均未发生不良事件。2.实验研究:(1)造模前各组小鼠体重逐周增加,同时间点各组间小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05);造模前后,除对照组外,其余各组小鼠体重显著下降(P<0.05);(2)与对照组比较,模型组肺组织W/D、肺组织损伤评分,BALF中总蛋白浓度、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比,血清和BALF中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肺组织MPO活性、ROS和MDA含量,肺组织NOX2、p47 phox蛋白表达及IκBα、NF-κB p65磷酸化水平,NF-κB核转移比例,肺组织Nox2及Nf-κb mRNA表达显著升高(P<0.01),而肺组织SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.01);(3)与模型组比较:(1)感咳颗粒低剂量组肺组织p47 phox蛋白表达及NF-κB p65磷酸化水平显著降低(P<0.05);(2)感咳颗粒中剂量组BALF中总蛋白浓度、肺组织MDA含量,肺组织NOX2、p47 phox蛋白表达及NF-κB p65磷酸化水平,NF-κB核转移比例显著降低(P<0.05或P<0.01);(3)感咳颗粒高剂量组肺组织W/D、肺组织损伤评分,BALF中总蛋白浓度、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比,血清和BALF中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肺组织MPO活性、ROS和MDA含量,肺组织NOX2、p47 phox蛋白表达及IκBα、NF-κB p65磷酸化水平,NF-κB核转移比例,肺组织Nox2及Nf-κb mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),肺组织SOOn-the-fly immunoassayD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05);(4)地塞米松组肺组织W/D、肺组织损伤评分,BALF中总蛋白浓度、中性粒细胞百分比,血清和BALF中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肺组织MPO活性、ROS和MDA含量,肺组织NOX2、p47 phox蛋白表达及IκBα、NF-κB p65磷酸化水平,NF-κB核转移比例,肺组织Nox2及Nf-κb mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),肺组织SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。结论1.临床研究:感咳颗粒联合西医常规治疗能显著改善轻型/普通型COVID-19患者咳嗽、头痛、咽痛、乏力等临床症状,缩短住院时间,且安全性高。2.实验研究:感咳颗粒能够减轻ALI小鼠肺组织病理损伤,潜在机制可能与其通过MRTX849研究购买抑制NOX2/ROS/NF-κB信号通路改善炎症和氧化应激有关。