心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞焦亡的影响

目的 探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞焦亡的调控作用。方法46只SD大鼠,其中随机取6只大鼠为空白组,余40只经腹腔注射阿霉素药物建立慢性心衰模型,模型成功后将32只大鼠随机分为模型组12只、心康冲剂组10只、缬沙坦组10只。缬沙坦组以等效剂量0.03g/(kg·d)灌胃、心康冲剂组给予0.5g/(kg·d)等效剂量灌胃。空白组与模型组每日等量生理盐水灌胃,连续4周。实验结束后,心脏超声检测各组大鼠心功能,HE、Masson染色观察心脏组织形态,透射电镜下观察心肌组织超微结构,免疫组化法检测焦亡底物消皮素D-N端片段(gasderminD-N,GSDMD-N)表达,酶联免疫吸附法检测大鼠血清白介素1β(interleukin-1β,ILFerrostatin-1 MW-1β)、白介素18(interleukin-18,IL-18)表达,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠心肌组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-likereceptorthermalproteindomainassociatedprotein3,NLRP3)通路各mRNA,Westernblot法检测NLRP3通路各蛋白表达量。结果 与空白组相比,模型组大鼠左室射血分数(leftventricularejectionfractions,LVEF)、左心室短轴缩短率(leftventricularfractionalshortening,LVFS)均明显降低(P<0.01),染色结果显示心肌细胞死亡增多、纤维化严重,且GSDMD-N焦亡蛋白表达在胞膜和胞浆,透射电镜结果显示模型组中心肌细胞膜有破裂,有孔隙形成,线粒体肿胀严重,血液中炎症因子IL-18、IL-1β明显升高(P<0.01),心肌组织中NL确认细节RP3、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine-containingaspartate-specificproteases-1,Caspase-1)、GSDMDmRNA及GSDMD-N蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,心康冲剂、缬沙坦干预后心肌细胞焦亡减轻,LVEF、LVFS都不同程度地增加(P<0Biodiesel Cryptococcus laurentii.01);染色及电镜结果显示心肌病理学损伤减轻;炎症因子IL-18、IL-1β及细胞焦亡通路NLRP3、Caspase-1、GSDMD/GSDMD-N的mRNA及蛋白都有所降低(P<0.01)。结论 心康冲剂可改善慢性心力衰竭大鼠心功能,抑制NLRP3细胞焦亡通路及下游产物,从而减轻心肌炎症,防止慢性心衰中的心肌细胞死亡过多。