以奥沙利铂(OXA)为基础的化疗失败或耐药可能导致结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)患者预后不良。据报道,奥利司他(Orli)在几种恶性肿瘤中表现出强大的抗肿瘤作用。本研究发现,在体外和体内实验中,OXA联合低剂量Orli可使CRC细胞对OXA增敏,并诱导显著的协同凋亡。通过计算机分析证实并量化了潜在的协同效应。此外,我们还在CRCPDX小鼠模型中验证了协同抗肿瘤作用。通过qPCR检测了 85个凋亡相关基因的变化,探讨联合诱导细胞毒性的可能分子机制。综上所述,OXA和Orli的抗肿瘤协同作Fer-1细胞培养用使它们成为治疗结直肠癌有效的配伍候选药物。研究背景和目的:CRC是世界上第二大常见癌症,癌症相关死亡的风险很高。目前,手术、化疗、放疗和免疫治疗是治疗CRC的重要策略。基于OXA的化疗方案是晚期CRC的一线治疗方法,但长期重复使用可能导致化疗失败或耐药,严重阻碍CRC患者的预后。此外,化疗方案(FOLFOX或CapeOx)的毒副作用,包括血液、胃肠和神经毒性,限制了方案应用的连续性,阻碍了临床治疗。因此,迫切需要研究一种新型化学增敏剂作为OXA的新组合,以提高临床治疗的疗效和安全性。Orli是一种强效且不可逆的脂肪酸合成酶(FASN)抑制剂,其主要功能是阻止人体饮食中的脂CL 318952研究购买肪吸收。由于其对脂质代谢的影响,Orli已被证明在包括胃肠道癌在内的多种恶性肿瘤中,表现出强大的抗肿瘤作用,但其联合奥沙利铂治疗CRC的效果及其内在分子学机制尚无研究报道。方法和材料:在体外实验中,选用人CRC细胞系HCT116以及LOVO作为研究对象,根据不同治疗方案下药物联合反应、细胞活力测定、划痕实验、克隆形成的结果,确定Orli和OXA的联用最佳剂量。通过绘制生长曲线、流式测定细胞凋亡比率及细胞周期探索小剂量Orli和OXA的协同治疗作用。在体内实验中,通过构建CRC裸鼠皮下瘤模型(Cell-Derived Tumor Xenograft,CDX)以及人源性肿瘤组织异种移植模型(Patient-Derived Tumor Xenograft,PDX),验证小剂量 Orli和 OXA 的体内协同治疗作用,并通过小鼠各脏器指数及组织切片HE评估联合用药方案的系统毒副作用。进一步通过基因芯片评估85个凋亡相关基因的变化,以阐明联合用药诱导的细胞毒性viral hepatic inflammation中可能的分子机制。结果:1 体外实验中,Orli的给药浓度为31.25 μM,是产生最强协同作用的最低浓度。联合用药(OXA和Orli)72小时的HCT116和LOVO细胞,生长速率显著协同降低。2 OXA和低剂量Orli处理的CRC细胞凋亡率增加,尤其是晚期凋亡增加。OXA和低剂量Orli处理使CRC细胞周期停滞在G1期。3 CDX模型中,低剂量奥利司他(50 mg/kg)增强了奥沙利铂诱导的细胞凋亡和对CRC的细胞毒性,并通过TUNEL染色观察到OXA联合Orli处理的分组中,肿瘤细胞凋亡率最高。4 体内毒性分析,器官指数无统计学差异,器官切片HE未观察到明显损伤。5 PDX模型中,低剂量奥利司他(50 mg/kg)增强了奥沙利铂诱导的细胞凋亡和对CRC的细胞毒性。6 对PDX模型中的肿瘤组织进行基因芯片评估85个凋亡相关基因。在OXA联合Orli处理组中获得了 21个与凋亡相关的特异基因,13个基因上调,8个基因下调。此外,我们进一步在HCT116和LOVO细胞系中验证了这些结果。结论1 奥利司他以远低于IC50的浓度仍能协同增强奥沙利铂对CRC细胞的细胞毒性。2 小剂量奥利司他可通过诱导和增加凋亡来增强奥沙利铂的协同细胞毒性,在体内体外可有效提高CRC的治疗效率,且具有安全、轻微的副作用。3 OXA和Orli联合使用显著增强了细胞凋亡通路。4 这些结果表明,OXA联合低剂量Orli是一种很有前景的临床治疗策略。