目的:通过高通量测序、生物信息学分析、临床数据分析以及细胞实验等挖掘外泌体环状RNA(Exosomal circular RNAs,exo-circ RNAs)在心肾阳虚型多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)相关心肌损伤的诊断、治疗与预后方面的价值,并进一步探讨exo-circ RNAs异常表达导致MM患者心肌损伤的可能机制。方法:参考《中医病证诊断疗效标准》中胸痹心肾阳虚、心气虚弱证自拟心肾阳虚型多发性骨髓瘤患者中医证候评分表,纳入符合心肾阳虚型标准的20位MM患者和5名健康对照者(Healthy control,HC),提取6位MM患者和5名HC的血清外泌体,利用高通量测序获得差异表达的exo-circ RNAs谱,实时定量PCR(q RTPCR)验证20位MM患者血清外泌体中circ-G042080的异常表达。采用ROC曲线、单因素和多因素COX回归模型对MM患者血清外泌体circ-G042080与MM相关心肌损伤的临床特征进行相关性分析。利用基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、mi Randa和Target Scan对exo-circ RNAs及下游目标基因进行差异表达的预测和生物信息学分析,构建circ RNA-mi RNA-m RNA互作网络,并通过双荧光素酶实验验证。将U266细胞来源的外泌体与H9C2细胞共孵育,探究circ-G042080过表达对心肌细胞的影响并验证其机制。结果:1.高通量测序分析显示,与HC组相比,心肾阳虚型MM患者血清外泌体中共鉴定出1035个显著上调的circ RNAs和507个显著下调的circ RNAs。q RT-PCR验证circ-G042080在20名MM患者血清外泌体中的异常高表达。2.临床相关性分析显示circ-G042080表达与心肾阳虚型MM患者的肌钙蛋白T(Troponin T,TNT)和B型利钠肽原(pro-B-type natriureticpeptide,pro BNP)水平呈正相关,与心室射血分数(ejection fraction,EF)和收缩压(systolic blood pressure,SPB)呈负相关。单因素和多因素Cox回归分析显示circ-G042080是心肾阳虚型MM相关心肌损伤的独立预后指标。q RT-PCR结果证实心肾阳虚型MM患者血清中circ-G0420selleck80与患者美国心脏病学会心功能分级(New York Heart Association Degree,NYHA-Degree)和pro BNP水平呈正相关。3.对异常表达的circ RNAs的GO与KEGG富集分析表明,上调的exo-circ RNAs与MM进展和心脏损伤发病机制密切相关,主要表现在“跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性的激活”“P38信号通路”“PI3K-Akt信号通路”“谷氨酸受体途径”和“钙离子途径”等条目的富集。靶基因预测及功能富集分析显示心肾阳虚型MM患者外泌体中过表达的circ-G042080可能通过Medication-assisted treatmentce RNA机制下调hsa-mi R-4268水平干预下游TLR4表达从而诱导MM相关心肌损伤的发生。双荧光素酶实验进一步证实了该ce RNA机制的存在。4.与对照组相比,与U266细胞外泌体共孵育的H9C2细胞的circ-G042080和TLR4水平显著升高,hsa-mi R-4268水平显著降低,细胞活力明显下降,自噬相关蛋白LC3和Beclin1表达水平升高,P62表达水平降低,细胞内自噬囊泡数量明显增多,用GW4869阻断外泌体后,这些效应均被逆转。结论:心肾阳虚型MM患者的血清中含有大量异常表达的exo-circ RNAs,其中circ-G042080表达水平显著升高,可作为心肾阳虚Nirmatrelvir体内实验剂量型MM相关心肌损伤患者临床诊断的新型生物标志物及独立预后指标。此外,外泌体circ-G042080可能通过circG042080/hsa-mi R-4268/TLR4轴参与MM相关心肌损伤的发生与进展,是潜在的MM相关心肌损伤治疗靶点。