基于Wnt信号通路研究黄芩汤干预炎症微环境下结肠癌细胞上皮间质转化与细胞周期进程的作用机制

目的 研究黄芩汤对炎症微环境下结肠癌HT-29细胞上皮间质转化与细胞周期进程的影响。方法 使用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导淋巴瘤THP-1细胞，取细胞上清液作为条件培养基，将条件培养基加入HT-29细胞培养体系中构建炎症微环境下结肠癌细胞模型，给予黄芩汤（500、250、125μg/mL）干预后，Transwell法检测细胞迁移与侵袭能力；Western blotting检测海马无翅基因3a(recombinant wingless type MMTV integration site family member 3a,Wnt3a)、β-连环蛋白（β-catenin）、E-cadherin、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthasc kinase-3β,GSK-3β)、细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白表达；qRT-PCR检测Wnt3a、β-catenin、E-cadherin、GSK-3β、CDK4和cyclin D1的m RNA表达。结果 与对照组比较，黄芩汤组迁移与侵袭的细胞数目均显著减少（P<0.01），细胞中Ecadherin、GSK-3β蛋白和m RNA表达水平均显著升Electrophoresis高（P<0.01MDV3100浓度）,CDK4、cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白和m RNA表达水平均显著降低（P<0.01），呈剂量相关性。结论 黄芩汤能够selleckchem KPT-330有效抑制炎症微环境下结肠癌细胞的上皮间质转化异常，其作用机制可能与降低经典Wnt通路中Wnt3a、β-catenin表达，同时促进E-cadherin、GSK-3β表达有关。黄芩汤还可通过有效抑制CDK4、cyclin D1的表达来修复周期检查点，从而调节炎症微环境下结肠癌细胞的细胞周期紊乱。