目的:探讨逍遥散联合双歧杆菌四联活菌对IBS-D的治疗效果,初步分析脑occult hepatitis B infection-肠互动在其干预中的作用机制,为其临床应用提供理论依据和数据参考。方法:回顾性分析国内外关于IBS-D大鼠Pidnarulex半抑制浓度模型的相关文献,分析其实验动物、造模方法。复制IBS-D大鼠模型,分为模型组、双歧杆菌四联活菌组(简称双歧杆菌组)、MLN4924采购逍遥散联合双歧杆菌四联活菌组(简称逍遥散联合双歧杆菌组),另取正常组大鼠作为对照。按照0.5g/kg剂量给予双歧杆菌组大鼠灌胃双歧杆菌混悬液,按照10.5g/kg剂量给予逍遥散联合双歧杆菌组大鼠灌胃逍遥散联合双歧杆菌四联活菌混悬液,模型组和正常组灌服等体积的蒸馏水,连续给药14d。于造模前及给药前后,对各组大鼠的一般行为学、粪便Bristol分型积分及粪便含水量进行测定。于给药前后对各组大鼠进行直肠气囊扩张实验,测定内脏敏感性压力阈值。于给药后取各组大鼠脑、肠组织HE染色观察组织病理改变情况,AB-PAS染色观察肠组织杯状细胞,对杯状细胞数量、肠绒毛长度及隐窝深度计量;ELISA法检测大鼠血清中SP、VIP、NGF、5-HT、NPY的含量及脑、肠组织中5-HT、NPY的含量;Western-Blot法测定海马、肠组织中5-HTR1a、5-HTR3a、5-HTR4含量;实时荧光定量PCR法检测小肠组织5-HTR1a、5-HTR3a、5-HTR4m RNA表达水平。结果:(1)基于回顾性分析得出,SD大鼠是最频繁被选用造模的实验动物,多因素复合造模方法是更好模拟IBS-D患者临床症状和病理机制的方法。(2)给药前,与正常组比较,各组IBS-D大鼠一般行为学评分与AWR压力阈值显著降低(P<0.05),Bristol评分与粪便含水量显著升高(P<0.05),杯状细胞计数、绒毛长度与隐窝深度与正常组无显著差异(P>0.05),血清SP与VIP含量显著升高(P<0.05),血清、脑组织与肠组织5-HT含量显著升高(P<0.05),血清与肠组织NPY含量显著降低(P<0.05),脑、肠组织5-HTR3a蛋白表达量及m RNA含量显著升高(P<0.05),5-HTR4蛋白表达量及m RNA含量显著降低(P<0.05)。(3)给药2W后,与模型组相比,双歧杆菌组大鼠一般行为学评分、AWR压力阈值无显著差异(P>0.05),Bristol评分与粪便含水量显著降低(P<0.05),血清SP与VIP含量显著降低(P<0.05),血清与肠组织5-HT含量降低(P<0.05),血清、脑肠组织NPY含量无显著差异(P>0.05),肠组织5-HTR3a蛋白表达量及m RNA含量显著降低(P<0.05),5-HTR4蛋白表达量及m RNA含量显著升高(P<0.05)。(4)给药2W后,逍遥散联合双歧杆菌组大鼠一般行为学评分恢复到了正常水平,与正常组无统计学差异(P>0.05),与模型组相比,逍遥散联合双歧杆菌组大鼠AWR压力阈值显著升高(P<0.05),Bristol评分与粪便含水量显著降低(P<0.05),血清SP与VIP含量显著降低(P<0.05),血清、脑组织与肠组织5-HT含量显著降低(P<0.05),脑组织NPY含量显著降低(P<0.05);肠组织5-HTR3a蛋白表达量及m RNA含量显著降低(P<0.05),5-HTR4蛋白表达量及m RNA含量显著升高(P<0.05)。结论:母婴分离法、束缚应激法、番泻叶灌胃联合醋酸直肠刺激的多因素复合方法可以成功建立IBS-D大鼠模型,此方法建立的IBS-D大鼠具有明显腹泻(表现为Bristol分型积分增加,粪便含水量升高)及腹痛(表现为内脏敏感性增强)的临床表现,但肠组织病理学改变不明显,与IBS-D患者临床特征有较高拟合性。双歧杆菌四联活菌及逍遥散联合双歧杆菌四联活菌均可显著减轻IBS-D所致腹痛、腹泻的症状,逍遥散联合双歧杆菌四联活菌的疗效更佳。逍遥散联合双歧杆菌四联活菌可能是通过下调血清中的SP、VIP及5-HT含量,上调血清中NGF、NPY含量,下调脑、肠组织中5-HT含量,上调肠组织中NPY含量,上调肠及海马组织中的5-HTR4含量,下调肠组织中5-HTR3a含量,同时下调肠组织中5-HTR3a m RNA表达量,上调肠组织中5-HTR4 m RNA表达量发挥治疗作用。