目的 以中空纤维作为细胞载体,建立人肝癌细胞株Hep G-2的中空纤维细胞捕获-高效液相色谱法(Hollow fiber cell capture-HPLC,HFCC-HPLC),通过该法筛选和鉴定人肝癌Hep G-2细胞中的主要抗癌活性成分;并建立中空纤维液相微萃取-高效液相色谱法(Hollow fiber liquid phase microextraction-HPLC,HFLPME-HPLC),通过该法对金刚藤主要活性成分在体外的富集、浓缩和萃取,测定。基于优化HFLPME-HPLC方法,研究金刚藤在动物体内药动Tibiocalcalneal arthrodesis学特征。方法 采用Hep G-2细胞作为靶细胞,将其接种在中空纤维的内腔中,并观测接种前后细胞的形态和活性变化。将接种有Hep G-2细胞的中空MK-1775采购纤维浸入金刚藤提取液中进行的抗癌活性成分的筛选实验,构建HFCC-HPLC方法。建立并优化HFLPME-HPLC方法,用来富集、萃取并检测金刚藤提取液中筛选的活性成分含量。通过灌胃一定浓度金刚藤提取液,利用HFLPME-HPLC方法研究不同时间给药KM小鼠肝脏内活性成分浓度随时间变化的规律。结果 本文构建了中空纤维细胞捕获-高效液相色谱法HFCC-HPLC及中空纤维液相微萃取-高效液相色谱法HFLPME-HPLC:(1)使用HFCC-HPLC法筛选出金刚藤提取液中主要的抗癌活性成分分别为绿原酸、落新妇苷、白藜芦醇、槲皮素和山奈酚;(2)使用优化的HFLPME-HPLC法检测了金刚藤提取液中活性成分的含量,分别为6.84 mg/g,19.33 mg/g,6.77 mg/g,12.42 mg/g,0.54 mg/g;(3)利用HFLPME-HPLC法测定了KM小鼠灌胃金刚藤提取液后,体内主要活性成分在肝脏中的浓度,并计算了其药动学参数,具体如下:绿原酸、落新妇苷、白藜芦醇、槲皮素和山奈酚五种化合物C_(max)分别为为0.927μg/m L,0.789μg/m L,0.285μg/m L,0.424μg/m L,0.817μg/m L,五种化合物t_(1/2)在48-320 min,达峰时间T_(max)在30-180 min。结论 由研究可知,HFCC-HPLC可以作为一种便捷和可靠的中药抗癌活性成分体外筛选方法,优化Belumosudil分子量的HFLPME-HPLC可作为一种具备富集指数高且灵敏度高的中药复杂成分检测方法。两种方法可以用于金刚藤抗癌活性成分的筛选及药动学研究。本研究的结果为金刚藤药材质量标准中有效物质细化研究提供参考,为阐明金刚藤中抗肝癌药效物质基础提供依据,为扩展金刚藤药理活性研究及临床应用提供思路。