目的:通过研究加味柴芍六君子汤对裸鼠皮下种植人原位胰腺(Pancreatic cancer,PC)组织中SRC蛋白表达水平的干预影响。探讨加味柴芍六君子汤对胰腺癌的作用机制,为使用加味柴芍六君子汤在临床治疗胰腺癌提供基础理论依据。材料与方法:用塑料夹每日夹住裸鼠尾巴30分钟左右,以使裸鼠变成慢性束缚诱导的肝郁裸鼠模型,同时将裸鼠饮用水配置成5%的食醋溶液,裸鼠全天饮用,造成肝郁脾虚型裸鼠模型。将人胰腺癌Bx PC-3细胞接种于肝郁脾虚型小鼠右前肢腋下皮下,造模成功后,采用随机数字表法,将24只肝郁脾虚型小鼠分成5组:模型对照组(0.9%氯化钠溶液)、中药低剂量组(加味柴芍六君子汤浓度0.473g/ml,0.2ml)、中药中剂量组(加味柴芍六君子汤浓度0.945g/mlselleck PD-0332991,0.2ml)、西药组(达沙替尼0.2mg/只),联合用药组(加味柴芍六君子汤浓度0.945g/ml,0.2mg+达沙替尼0.2 mg/只)。每隔4天使用游标卡尺测量每只裸鼠的皮下种植瘤大小。给药20d后处死小鼠,取出移植瘤,观察后用多聚甲醛固定和-80℃冷冻备用。检测指标:用电子秤称量裸鼠治疗前和治疗后小鼠体重,取材后称种植瘤瘤重,计算抑瘤率。使用数据分析给药0、4、8、12、16、20天移植瘤体积。采用免疫组织化学染色法和蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测胰腺癌裸鼠移植瘤组织中SRC蛋白表达水平。使用SPSS 26统计软件对实验过程中获得的数据进行分析,得出结论,以P<0.05具有统计学差异。结果:1.成瘤率:以人原位癌细胞Bx PC-3细胞悬液后肉眼可见瘤体并逐日变大,且肿瘤最大直径≥5mm视为造模成功。24只裸鼠均造模成功。2.裸鼠一般状态:小鼠精神萎靡,活动减少,嗜睡懒动,拱背蜷缩,裸鼠体重明显减轻,便溏。3.给药前后各组裸鼠体重变化以及瘤体积:给药各组裸鼠与模型组对比,平均体重降低的趋势明显降低,瘤体积也明显减轻(P<0.05)。治疗后,各组裸鼠平均体重为:模型对照组(15.08±0.29)g,中药低剂量组(15.72±0.29)g,中药中剂量组(16.64±0.29)g,西药组(17.58±0.42)g,联合用药组(18.32±0.32)g。瘤体积为:模型对照组(1069.203±52.303)mm~3,中药低剂量组(1033.585±32.944)mm~3,中药中剂量组(949.190±13.265)mm~3,西药组(813.542±31.803)mm~3,联合用药组(760.006±18.832)mm~3。可以发现,给药各组对比模型组相比,种植瘤生长被抑制,瘤体积明显减小,且具有统计学意义(P<0.05)。4.瘤重及抑瘤率计算:灌胃结束,称量各组裸鼠皮下种植瘤瘤重结果为:模型对照组(2.04±0.04)g,中药低剂量组(1.91±0.04)g,中药中剂量组(1.83±0.04)g,西药组(1.53±0.05)g,联合用药组(1.41±0.01)g。结果显示,给药各组裸鼠瘤重明显小于模型对照组(P<0.05),且联合用药组裸鼠平均瘤重最轻,疗效最好。中药低剂量组的抑瘤率为6.3%,中药中剂量组的抑瘤率为10.2%,西药组的抑瘤率为25%,联合用药组的抑瘤率为30.9%。5.蛋白表达水平:免疫组织化学染色法和蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测显示:中药中Biometal trace analysis剂量组,西药组和联合用药组与模型对照组相比SRC蛋白表达水平明显下降(P<0.05),中药低剂量组与西药组和联合用药组相比有统计学意义(P<0.05),中药中剂量组与西药组和联合用药组相比有统计学意义(P<0.05),蛋白质免疫印迹法的结果显示,与模型对照组相比,中药低剂量组,中药中剂量组,西药组和联合用药组裸鼠种植瘤组织中SRC蛋白表达水平明显下降,且具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在胰腺癌裸鼠模型中,给药各组的种植瘤体积,瘤重均小于模型对照组,且给药各组裸鼠体重下降趋势也缓于模型对照组,说明加味柴芍六君子汤与达沙替尼均具有抗肿瘤增殖增长的作用。且实验中联合用药组的肿瘤抑制效果最为明显,说明加味柴芍六君子汤加达沙替尼合用具有疗效增强的效果。实验中中药中剂量组疗效要优于中药低剂量组,肯定了临床常用的药量。治疗结束后,联合用药组的裸鼠体重最高,说明该药物治疗可以一定程度上减缓胰腺癌恶病质。2.免疫组织化学染色和免疫蛋白印记法的结果表明,加味柴芍六君子汤可以抑制胰腺癌组织中SRC蛋白的NN2211半抑制浓度表达水平,进而抑制胰腺癌组织的增殖生长。