目的:本研究通过细胞和动物实验探讨低剂量放疗是否可以通过调控肿瘤相关巨噬细胞抑制BDNF、Trkb,进而抑制肺癌进展。方法:将购买的Lewis肺癌细胞系(LLC)复苏、传代培养,第3代及饱和度大于80%用于后续实验研究。选6周龄C57BL/6雌性小鼠,平均体重20±2g,皮下注射Lewis肺癌细胞(LLC)1×10~6个/只,制作成Lewis肺癌荷瘤鼠模型,待摸到腋下瘤体每7天测量瘤体大小(体积=长×宽×0.5),绘制不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤生长变化曲线。待瘤体大小约0.8×0.8cm根据治疗方案随机分配为4组,每组10只,分别为:LLC组:0Gy;LLC+2Gy组:2Gy×18F;LLC+8Gy组:8Gy×3F;LLC+16.4Gy组:16.4Gy×1F,进行放射治疗。放射治疗后Canagliflozin分子量每组选取6只小鼠处死,留取不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织及血清于﹣80℃冰箱保存,肿瘤组织标本切片分别做HE染色、Tunel染色,比较各组肿瘤组织病理变化及细胞凋亡情况;Western blot方法检测Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织中BDNF、TRKB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达情况;LLC组及LLC+2Gy组肿瘤组织标本切片行免疫荧光染色,明确LLC组及LLC+2Gy组M1及M2型巨噬细胞浸润水平;ELISA检测LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠血清中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS及抗炎细胞因子IL-10的表达水平。将培养的LLC细胞分为4组,分别为:LLC组;LLC+2Gy组;LLC+8Gy组;LLC+16.4Gy组。分别用不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠血清培养相应处理组LLC细胞。分别做EDU染色、流式细胞术(FCM)评估细胞增殖、凋亡及活性氧水平;Western blot方法检测LLC细胞中BDNF、TRKB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平。结果:1.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠瘤体变化:LLC组瘤体增长速率明显比放疗组快,LLC+8Gy组和LLC+1IACS-0107596.4Gy组瘤体控制效果优于LLC+2Gy组;2.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片HE染色:LLC组组织中癌细胞最多,组织癌化最严重,LLC+2Gy组、LLC+8Gy组、LLC+16.4Gy组组织癌化程度依次减轻;3.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片Tunel染色:与LLC组相比,放疗组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织细胞凋亡增多,LLC+2Gy组、LLC+8Gy组、LLC+16.4Gy组肿瘤组织细胞凋亡依次增多;4.WesUrinary microbiometern blot方法检测Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织中BDNF、TrkB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平:与LLC组比较,放疗组抗凋亡蛋白Bcl-2低表达(P<0.01),促凋亡蛋白BAX、凋亡相关因子cytochrome C、Caspase-9高表达(P<0.01),放疗组各组间差异无统计学意义;与LLC组比较,放疗组BDNF-TrkB低表达(P<0.01),LLC+2Gy组最低(P<0.01),LLC+8Gy和LLC+16.4Gy组差异无统计学意义;5.LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片CD68、CD80、CD163免疫荧光染色:与LLC组相比,CD80标记的M1型巨噬细胞在LLC+2Gy组显示高表达(P<0.01),CD163标记的M2型巨噬细胞在LLC+2Gy组显示低表达(P<0.01);6.ELISA检测LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS、IL-10的表达水平:与LLC组相比,LLC+2Gy组肺癌荷瘤鼠血清中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS高表达(P<0.01),抗炎细胞因子IL-10低表达(P<0.01);7.不同处理组LLC细胞EDU染色:与LLC组相比放疗组LLC增殖减少,LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组细胞增殖依次减少;8.FCM检测不同处理组LLC凋亡:与LCC组相比放疗组凋亡率升高(P<0.05),LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组凋亡率依次升高(P<0.05),LLC+16.4Gy组的细胞凋亡率最高(P<0.01);9.FCM检测不同处理组LLC活性氧水平:与LCC组相比LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组活性氧水平均升高,其中LLC+16.4组升高最明显;10.Western blot方法检测不同处理组LLC细胞中BDNF、TrkB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平:与LLC组比较,放疗组抗凋亡蛋白Bcl-2低表达(P<0.01),促凋亡蛋白BAX、凋亡相关因子cytochrome C、Caspase-9高表达(P<0.01),放疗组各组间差异无统计学意义;与LLC组比较,放疗组BDNF、TrkB低表达(P<0.01),LLC+2Gy组最低(P<0.01),LLC+8Gy和LLC+16.4Gy组差异无统计学意义。结论:低剂量放疗促进M1型巨噬细胞极化,抗炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS分泌增多,进而抑制BDNF、Trkb,从而抑制肿瘤增殖及促进肿瘤凋亡,抑制肺癌进展。