犬2型腺病毒(CAV-2)是一种引起犬感染性喉气管炎和感染性腹泻的哺乳动物腺病毒。动物感染腺病毒在世界范围内均有发生,其中CAV-2在临床中具有较高的感染率,但其发病多具有一过性,且易与其他病毒混合感染,因而常被临床医师忽视影响治疗效果。此外,腺病毒载体因其高效、安全、简便、Stress biomarkers可靠等特点,正成为重组疫苗技术和未来基因移植治疗研究的新热点。本研究从河南某发病犬的分泌物中分离到1株犬2型腺病毒(CANSC 127716化学结构V-HN45)。采用PCR、电镜、基因测序和相关基因的进化树建立及分析等方法对该分离株进行鉴定,并与世界范围内流行的腺病毒毒株进行比较分析,该毒株与广泛用于疫苗的CAV-2标准株Toronto A26/61毒株有较高的相似性,提示接种疫苗可能引起了犬的重复感染。研究了CAV-HN45分离株的生长特征并比较不同细胞系对CAV-HN45的敏感性,发现其能在体外除了能感染猪源的PK15、3D4/21、ST和犬源的MDCK细胞,还能感染人源的Hela细胞并能连续培养6代。这些研究为监测CAV-2感染的流行病学提供数据,并有助于了解国内CAV-2的遗传进化和新疫苗的开发,为今后高选择性表达腺病毒载体的研究提供参考。国内用于检测CAV-2的试剂盒和治疗CAV-2的血清和疫苗多为进口,并非针对我国的病毒流行病学情况。并且腺病毒可在家养和野生的各种动物群中广泛传播,故对其快速有效的检测手段和流行情况的监控尤为重要,但现在临床诊断中使用的试剂盒的准确性不高,易出现误诊或患病早期诊断不出的情况。仅能将临床样本送样至实验室诊断的方法来进行复核确诊,但此方法检测效率很低,无法满足临床中大量样本的快速检测。本研究旨在获得可用于CAV-2实验室检测、临床诊疗、相关检测和治疗试剂研发所需的单克隆抗体。将CAV-HN45分离株浓缩并灭活后作为抗原免疫BALB/cLEE011抑制剂小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞通过融合技术进行融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验和间接免疫荧光试验筛选出2株能分泌CAV fiber蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞系,并制备腹水经过纯化浓缩,制作出2株灵敏性高、特异性强的针对CAV-2 fiber蛋白单克隆抗体:1-A12-C6、8-A12-B10,抗体亚类为分别为Ig G2a和Ig G2b。腹水纯化后浓度为1 mg/m L抗体的间接免疫荧光效价为1-A12-C6:1∶8192;8-A12-B10:1∶2048。制备的抗体具有体外中和病毒的活性,1-A12-C6和8-A12-B10抗体的CAV中和效价分别为1∶256和1∶64。这为建立快速、高效的CAV-2免疫学检测技术和基础病毒学研究提供了材料,为我国对CAV-2的防控和治疗提供了备选抗体药物和参考材料。